EFECTO DE LA SUPLEMENTACIÓN CON GLICEROL (GLY) DURANTE EL TRATAMIENTO CON SORAFENIB (SFB) EN CÉLULAS DE CARCINOMA HEPATOCELULAR HUMANO (HCC)

CHARES, LG; QUIROGA, AD; ALVAREZ, ML; CEBALLOS, MP

Congreso; Sociedad de Biología de Rosario; 2023

El HCC es una de las principales causas de muerte por cáncer en el mundo. Esto se debe, en parte, a que es diagnosticado en etapas avanzadas donde los tratamientos disponibles no resultan eficaces. Aunque SFB se utiliza como uno de los tratamientos de primera línea, solo prolonga pocos meses la sobrevida de los pacientes. Es necesaria la búsqueda de mejores terapias contra el HCC. Basados en estudios previos del grupo que mostraron los efectos antiproliferativos y proapoptóticos del GLY en un modelo in vivo de carcinogénesis hepática, planteamos que el GLY podría ser utilizado en combinación con SFB para el tratamiento del HCC. Objetivo: analizar si el GLY mejora la sensibilidad de las células de HCC a SFB in vitro, en la línea celular de HCC Huh7. Métodos: Cultivos 2D (monocapa) y 3D (esferoides) fueron tratados durante 72 h con diferentes concentraciones de SFB (2D: 0,5-8 μΜ, 3D: 1-32 μΜ) o GLY (2D: 0,25-4 μΜ, 3D: 0,5-32 μΜ) para obtener curvas dosis-respuesta y establecer las concentraciones de trabajo. Luego, los cultivos se trataron durante 72 h con SFB (2D: 2μΜ; 3D: 4μΜ), con GLY (2D: 1μΜ; 3D: 2μΜ), con la combinación SFB+GLY, o con el vehículo dimetilsulfóxido (grupo control). Se estudiaron la viabilidad (2D: bromuro de 3(4,5 dimetil-2-tiazoil)-2,5-difeniltetrazólico; 3D: fosfatasa ácida), proliferación (3D: crecimiento del esferoide 72h/0h), migración (2D: cierre de la herida; 3D: migración del esferoide), invasión (2D: placas transpocillo) y apoptosis (2D: tinción con anexina V/ioduro de propidio y citometría). $p<0,05 vs. cultivo 2D; *p<0,05 vs. control; #p<0,05 vs. SFB; &p<0,05 vs. GLY. Resultados: El SFB y el GLY redujeron la viabilidad en los cultivos 2D y 3D de forma dosis-dependiente. El cultivo 3D fue menos sensible que el 2D (concentración que inhibe el 50% de la viabilidad celular: SFB 2D: 3,4 μΜ, 3D: 13,7 μΜ$; GLY 2D: 2,4 μΜ, 3D: 10 μΜ$). En cultivos 3D, ambos compuestos redujeron el crecimiento de los esferoides en forma dosis-dependiente. Los cultivos tratados con SFB+GLY mostraron una mayor disminución de la viabilidad en comparación con los cultivos bajo los tratamientos individuales (2D: SFB -23%*, GLY -22%*, SFB+GLY -56%*#&; 3D: SFB -16 %, GLY -1 %, SFB+GLY -42 %*#&). El tratamiento de los cultivos 3D con SFB+GLY disminuyó el crecimiento de los esferoides en comparación con los tratamientos individuales (SFB -25%*, GLY -11%*, SFB+GLY -35%*#&). El tratamiento con SFB+GLY produjo la mayor reducción en la migración celular en cultivos 2D y 3D. Se observó una disminución significativa de la invasión celular en el grupo combinado con respecto a los tratamientos individuales (SFB -66%*, GLY -48%*, SFB+GLY -86%*#&). SFB+GLY aumentó la apoptosis de las células tratadas (SFB +49%*, GLY +10%, SFB+GLY +90%*#&). Conclusiones: El GLY exacerba los efectos de SFB sobre la supervivencia, migración e invasión de células de HCC, incrementando la apoptosis de las mismas. Si bien son necesarios más estudios que respalden estos hallazgos e indagar en los mecanismos implicados, los resultados son alentadores en cuanto a la posibilidad de combinar GLY y SFB como terapia contra el HCC.