ESTUDIO DE LA INHIBICIÓN DE LA ENZIMA LEUCOTRIENO A4 HIDROLASA (LTA4H) EN LA LÍNEA DE CARCINOMA HEPATOCELULAR (HCC) HUH7

FRATTINI, M; CHARES, LG; CEBALLOS, MP; FERRETTI, AC; OVIEDO BUSTOS, L; COMANZO, CG; PALMA, NF; QUIROGA, AD; ALVAREZ, ML

Congreso; SOCIEDAD DE BIOLOGÍA DE ROSARIO; 2022

Introducción: Los leucotrienos (LT) son eicosanoides derivados del ácido araquidónico. El LTB4 se sintetiza a partir de la hidrólisis del LTA4 por acción de la enzima LTA4H. En un trabajo reciente se observó que la vía LTA4H/LTB4 juega un rol importante en la proliferación hepática “controlada” posterior a una hepatectomía parcial, por lo que también podría participar en la proliferación “descontrolada” que tiene lugar en el HCC. En este sentido, se ha reportado que hay una sobreproducción de LTB4 en varios tipos de cánceres humanos, y que el mismo estimula la proliferación de las células cancerosas. Objetivo: Analizar el efecto de la inhibición de la enzima LTA4H sobre la proliferación y migración de células de HCC en cultivos 2D. Materiales y métodos: Las células de HCC humano Huh7 se trataron con bestatina (BST), inhibidor competitivo de la LTA4H, o se dejaron sin tratar (control, C). Se estudiaron la viabilidad celular mediante el ensayo de MTT (72 h), la migración celular por cierre de la herida (24 h) y la expresión de proteínas clave de proliferación (PCNA y Ciclina D1) y apoptosis (Bax y Bcl-xl) por western blot (72 h). Resultados: Mediante la realización de curvas dosis-respuesta, se estableció la concentración de trabajo de BST en 200 μM. El estudio de viabilidad celular mostró una disminución significativa de la misma en las células tratadas con BST: C 100,0 ± 0,5 %; BST 73,6 ± 1,3 %*. La migración celular (distancia migrada en μm) también disminuyó en el grupo tratado con el inhibidor: C 238 ± 7; BST 187 ± 4*. El estudio de la expresión proteica de PCNA y Ciclina D1 mostró que ambos marcadores de proliferación celular disminuyeron en el grupo tratado con BST: PCNA: C 100 ± 9 %; BST 52 ± 5 %**; Ciclina D1: C 104± 4 %; BST 70 ± 7%** (*p <0,001; **p<0,01). Los niveles de los marcadores de apoptosis Bax (proapoptótico) y Bcl-xl (antiapoptótico) no mostraron diferencias significativas entre los grupos C y BST. Conclusión: La inhibición de la LTA4H mediante el uso de BST reduce la viabilidad y la migración celular de la línea en estudio. La disminución de la viabilidad se asocia con una reducción de los niveles de PCNA y Ciclina D1, proteínas esenciales para la proliferación celular. Sin embargo, la inducción de la apoptosis no estaría involucrada en los efectos del inhibidor sobre la viabilidad de las células de HCC. Si bien son preliminares, estos estudios apoyan la participación de la vía LTA4H/LTB4 en el HCC y alientan profundizar el estudio de su inhibición farmacológica como estrategia para el tratamiento del cáncer de hígado.