Rol de hidrolasas ácidas durante la atresia folicular de Dipetalogaster maxima, un vector de la enfermedad de Chagas

LEYRIA J; AGUIRRE S; FRUTTERO L; CARLINI C.; RUBIOLO ER; CANAVOSO L

San Juan

Jornada; Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina, XVIII; 2011

Sociedades de Biología de la República Argentina

 En insectos, la principal proteína precursora del huevo o vitelogenina (Vg) es captada por ovocitos en desarrollo, almacenada como vitelina (Vt) en estructuras especializadas y degradada durante la embriogénesis. Cuando los factores nutricionales no son adecuados para estimular la síntesis de Vg, se promueven cambios en el tejido ovárico que se manifiestan con la degradación temprana de vitelina y la atresia de algunos folículos. En numerosas especies, la atresia folicular es una estrategia que facilita la redistribución de nutrientes y el mantenimiento metabólico de folículos más jóvenes. En los vectores de la enfermedad de Chagas,  este proceso ha sido escasamente explorado. Nuestro objetivo fue investigar los cambios bioquímicos que acontecen durante la instauración de la atresia folicular inducida por un déficit nutricional en el vector Dipetalogaster maxima, haciendo énfasis en el rol de dos hidrolasas ácidas, catepsina D (CD) y fosfatasa ácida (FA). La proteólisis de Vt fue explorada mediante western blot, empleando un anticuerpo anti-Vt. La actividad de FA y catepsinas totales se evaluó con ensayos enzimáticos colorimétricos, en tanto, la actividad de CD se determinó empleando un sustrato fluorogénico. La localización de CD en el tejido ovárico atrésico se evidenció por medio de inmunofluorescencia. La interacción entre FA y CD se analizó mediante ensayos de proteólisis in vitro utilizando inhibidores específicos para ambas enzimas y homogenatos de tejido ovárico atrésico. Los resultados mostraron que en D. maxima, la proteólisis de Vt ocurre gradualmente durante la transición de la vitelogénesis a la atresia folicular. En correlación con estos hallazgos, se observó una mayor actividad de FA y CD en la fase atrésica, respecto a lo observado en la pre-vitelogénesis y vitelogénesis. Los ensayos de proteólisis in vitro demostraron que FA es importante para promover la degradación de Vt mediada principalmente por CD. Los cambios bioquímicos observados durante la atresia folicular reflejarían la adecuación del tejido ovárico para afrontar un nuevo ciclo gonadotrófico si las condiciones nutricionales desfavorables de la hembra son revertidas. Los resultados permitirán comprender aspectos poco explorados de la biología de estos insectos, los que podrían ser de potencial aplicación en estrategias de control vectorial.