Las proteínas de superficie de Listeria monocytogenes InlG y Vip modulan la actividad del factor sigma de stress SigB

LAURA BOTELLO-MORTE; ENRIQUE CALVO; JAVIER FERNANDO MARISCOTTI; FRANCISCO GARCÍA-DEL PORTILLO; M. GRACIELA PUCCIARELLI

Barcelona

Congreso; VIII Reunión del Grupo de Microbiología Molecular de la Sociedad Española de Microbiología; 2010

Sociedad Española de Microbiología

Listeria monocytogenes es un patógeno intracelular Gram-positivo que causa enfermedades graves en animales y humanos. Esta bacteria es capaz de atravesar barreras naturales de defensa, como el epitelio intestinal, la placenta, o la barrera hematoencefálica. La era genómica puso de manifiesto la presencia en todas las especies del género Listeria de un número considerable de genes que codifican proteínas de superficie con motivos LPXTG de unión covalente a peptidoglicano. Esta cifra se mantiene en torno a 40-45 proteínas según la cepa secuenciada. Nuestros ensayos de proteómica realizados en la cepa EGDe de L. monocytogenes revelaron que pueden identificarse en extractos de peptidoglicano hasta un total de 25 proteínas del total de 41 anotadas en esta cepa. De éstas, sólo se conoce la función de 4 de ellas, incluyendo la invasina internalina-A (Inl-A). Nuestro siguiente objetivo se ha centrado en determinar si existen fenómenos de regulación que expliquen cómo se coordina la expresión de esta extensa familia de proteínas. Para comprobar esta hipótesis, se han construido una colección completa de mutantes deficientes en cada una de las proteínas LPXTG conocidas en esta estirpe EGDe, así como generado anticuerpos específicos. El análisis proteómico realizado sobre muestras de peptidoglicano de estos mutantes ha demostrado que en dos de ellos, los carentes de las proteínas Lmo0262 (InlG) ó Lmo0320 (Vip), se produce un descenso notable en los niveles de otras cuatro proteínas LPXTG, en concreto Lmo0263, Lmo0610, Lmo0880 y Lmo2085. Trabajos de otros grupos habían demostrado que la producción de estas cuatro proteínas es regulada por el factor sigma alternativo SigB, el cual responde a señales de estrés osmótico y de pH. Nuestro modelo de trabajo implica una relación funcional entre la InlG y Vip y el aparato de respuesta a estrés (conocido como "estresosoma"), el cual se activa por mecanismos que actúan a nivel de cascadas de fosforilación que desencadenan en una proteína inhibidora de SigB. Distintos abordajes, incluyendo la caracterización de posible interacciones entre InlG, Vip y componentes del estresosoma, además de ensayos de virulencia en modelos animales, están siendo realizados en la actualidad para comprobar esta conexión funcional entre proteínas de pared y una respuesta que se dispara en el interior de la bacteria.