Análisis genómico de estirpes deficientes en el atenuador de crecimiento intracelular IgaA de Salmonella enterica

JAVIER FERNANDO MARISCOTTI; FRANCISCO GARCÍA-DEL PORTILLO

Malaga

Congreso; XXX Congreso Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular; 2007

Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular

La proteína esencial IgaA ejerce una regulación negativa sobre el sistema de transferencia de fosfatos RcsCBD. La inactivación de igaA es posible en fondos genéticos rcsC, rcsB o rcsD, lo que sostiene la idea de que la letalidad asociada a la pérdida de IgaA esta relacionada directamente con la sobre-activación del sistema de RcsCBD. En este trabajo caracterizamos tres grupos fenotípicos de mutantes del serovar Typhimurium supresores espontáneos de la letalidad asociada a la pérdida de IgaA, que inactivan o mantienen bajos niveles de activación del sistema RcsCBD. El grupo I formado por estirpes no mucosas que experimentan deleciones en el locus rcsD-rcsB-rcsC. Mediante un análisis de genómica comparativa con hibridaciones ADN-ADN sobre microarrays del serovar Typhimurium, hemos sido capaces de confirmar que en estas estirpes las pérdidas espontáneas de ADN se producen exclusivamente en el locus rcsD-rcsB-rcsC y no en otras regiones del cromosoma. El grupo II, incluye estirpes que presentan una deleción en el extremo 5' del gen rcsC, que se traduce en niveles más bajos de la proteína RcsC. Presentan una nivel activación del sistema RcsCBD 20 veces más bajo que en el mutante igaA1 y no alteran la virulencia. El grupo III constituido por una estirpe mucosa con una deleción en la región promotora del gen rcsD que causa una disminución de los niveles de RcsD. Interesantemente, en este caso la activación del sistema RcsCBD es 8 veces más bajo que en el mutante igaA1 y provoca una fuerte atenuación de virulencia. Teniendo en cuenta esto, realizamos estudios de transcriptoma para analizar las posibles diferencias funcionales existentes entre las estirpes con distintos niveles de actividad del sistema RcsCBD.