Sistema génico regulable bidireccional para timulina y GFP: caracterización in vivo de su funcionabilidad y regulabilidad

ZAPPA VILLAR MF; LÓPEZ-LEÓN M; PARDO J; REGGIANI PC

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación clínica; 2013

La timulina posee actividad inmunomoduladora; es capaz de modular procesos inflamatorios a nivel central, periférico y local, y procesos analgésicos en el SNC. Recientemente hemos implementado exitosamente terapia génica neuroendocrina con esta hormona en modelos animales de timodeficiencia. Con el fin de disponer de una herramienta más flexible y sofisticada que nos permita ampliar nuestros estudios sobre los efectos terapéuticos de la timulina con una mejor manipulación y control sobre su producción, construimos un sistema génico bidireccional regulable Tet-Off que simultáneamente expresa el gen del metFTS (análogo de timulina) y de la proteína verde fluorescente (GFP), ambos bajo el control de un promotor inducible por doxiciclina (DOX), denominado RAd-(GFPTRE-FTS)-(tTA). El objetivo del presente trabajo fue caracterizar dicho sistema en músculo (i.m.), cerebro (i.c.v.) e hipófisis y de la rata, evaluando la funcionalidad y regulabilidad del sistema. El adenovector (RAd) se administró bilateralmente en el músculo tibial (2x108 pfu/rata), en los ventrículos laterales (2x108 pfu/rata) y en la adenohipófisis (2x107 pfu/rata). La expresión de GFP se determinó por observación microscópica y la timulina fue medida por un bioensayo de rosetas. El RAd mostró ser activo en todos los tejidos estudiados. En el músculo estriado se logró una expresión a largo plazo de los transgenes; observándose un aumento de timulina sérica (P