EFECTOS DE LA HIPOXIA EN LA GENERACIÓN DE CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES INDUCIDAS HUMANAS

QUESTA MARÍA; SOLARI CLAUDIA; LOSINO NOELIA; ROMORINI LEONARDO; BLUGUERMANN CAROLINA; FERNANDEZ ESPINOZA DARIO DAMIAN; RICHARDSON VIDELA GUILLERMO; SEVLEVER GUSTAVO EMILIO; GUBERMANN ALEJANDRA; MIRIUKA SANTIAGO G

Congreso; LVII REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2012

Las células somáticas humanas pueden ser reprogramadas aCélulas Madre Pluripotentes Inducidas (CMPi), las cuales pueden,a su vez, diferenciarse a cualquier célula adulta. Esta caracterís-tica es de gran interés en medicina regenerativa y en el estudioin vitro de enfermedades genéticas. Para su validez se requierenciertos criterios como morfología de células pluripotentes, auto-renovación ilimitada, expresión de marcadores de pluripotencia,downregulación de marcadores de diferenciación, independenciade los factores utilizados para su reprogramación y conformidadcon pruebas de diferenciación. Los objetivos del presente trabajofueron la reprogramación de fibroblastos humanos a CMPi bajocondiciones de normoxia e hipoxia a fin de comparar eficiencias,caracterizar las líneas obtenidas y analizar su identidad pluripo-tente en las distintas condiciones. La reprogramación se realizóintroduciendo Factores de Transcripción embrionarios medianteun sistema lentiviral. Se establecieron las líneas de CMPi y selas validó, confirmándose características morfológicas y prolife-rativas de células pluripotentes, alta expresión de marcadoresde pluripotencia, capacidad de diferenciación a las tres capasgerminales y formación de teratomas, confirmando pluripotenciain vitro e in vivo. Se comparó la eficiencia de su generación enhipoxia y normoxia y se evaluó la expresión de marcadores depluripotencia y blancos de hipoxia en cultivo crónico o agudo al5% de O2. Se encontró que la generación de CMPi en hipoxia esmenos eficiente que en normoxia, pero no se encontraron dife-rencias de pluripotencia entre las líneas generadas en normoxiay en hipoxia crónica. En cambio, se encontraron diferencias en laexpresión de marcadores de pluripotencia durante el cultivo hipóxi-co agudo, en contraste con normoxia. En conclusión, la expresiónde marcadores de pluripotencia no se ve aumentada al cultivarCMPi en hipoxia crónica, pero podría estarlo en hipoxia aguda.