Expresión diferencial del canal de protones (Hv1) en células de origen linfoide y mieloide: nuevo rol del canal en el contexto de desregulación metabólica

ENRIQUE, N; ISSOURIBEHERE, D; VENTURA CLARA; ASUAJE A; FANESSI, VIVIANA; MARTÍN, PEDRO; BODONE, JAVIER; SCANDIZZO, HILDA EMILIA; MILESI, VERONICA

Mendoza

Congreso; XXIV Congreso Argentino de Hematología,; 2019

Se ha demostrado en distintos tipos de cáncer que las célulastumorales realizan un cambio del metabolismo energético hacia víasglicolíticas, que terminan generando una mayor concentración deespecies ácidas. Este fenómeno se conoce como efecto Warburg [1] yactualmente se considera a esta desregulación metabólica como una delas características comunes distintivas del cáncer (del ingléshallmarks of cancer) [2]. De no mediar mecanismos de compensación queeliminen el exceso de ácido generado por el cambio metabólico, lasobrevida de la célula tumoral estaría comprometida. Por lo tanto, lasestructuras celulares capaces de disminuir la carga ácida, le otorganuna ventaja de escape de la apoptosis y una mayor posibilidad deproliferación tumoral. El canal Hv1 es una proteína de membrana capazde mediar el eflujo de H+ y su actividad representa una vía rápidapara revertir cargas ácidas. Nuestra hipótesis plantea que tanto suexpresión como su actividad puede estar aumentada en las célulastumorales, evitando la acidificación intracelular generada por elaumento del metabolismo, confiriendo a las células neoplásicas una víade escape de la apoptosis.El canal Hv1 se expresa y es funcional entodas las células del sistema inmune. Sin embargo se desconoce supatrón de expresión y su rol funcional en las neoplasiashematológicas, las cuales presentan la desregulación metabólicacaracterística de las células tumorales [3].OBJETIVOSEn este marcogeneral, este trabajo tiene un primer objetivo que es cuantificar laexpresión del canal Hv1 en células tumorales de origen linfoide ymieloide de pacientes con derivación clínica para diagnóstico deneoplasia hematológica. Específicamente, mediante el uso de unanticuerpo específico para el canal evaluamos la expresión del mismoen los distintos tipos celulares que componen las muestras de aspiradode médula ósea. Posteriormente y en función de los resultadosobtenidos estudiaremos sus propiedades electrofisiológicas y su rolfuncional en este tipo de patologías.MATERIAL Y MÉTODOSEn colaboracióncon el Servicio de Citometría de Flujo del sector Hematología delLaboratorio del Hospital El Cruce de la Prov. de Buenos Aires,cuantificamos la presencia del canal Hv1 en muestras de aspirado demédula ósea de pacientes con derivación clínica para diagnóstico deneoplasia hematológica.Las muestras llegan al sector en tubosanticoagulados con EDTA y se procesa con los protocolos clásicos depreparación de las células para citometría. Se realizó lacuantificación de la intensidad de fluorescencia del marcador delcanal Hv1 y se compararon los valores obtenidos en las célulaspatológicas con los valores de las células residuales normales de lamisma estirpe. Se utilizó el Test de Mann-Whitney no paramétrico paraanalizar la significancia estadística de los niveles de marca delcanal en las poblaciones celulares normales y patológicas. Seanalizaron hasta la fecha 5 casos con las siguientes patologíaslinfoides crónicas: Mieloma múltiple MM (1), Linfoma no-Hodgkin T(LGL-T (1), otros (2) y LNH-T Enfermedad Mínima Residual (1)).Losresultados obtenidos se presentan en el siguiente gráfico comodiferencias de intensidad de fluorescencia (IF), comparando célulaspatológicas con células residuales normales (GRAFICO)CONCLUSIONESDeeste primer análisis se observa que nuestra hipótesis se verifica enmuestras de pacientes con patologías oncohematológicas de tipo T, enlas cuales se encontró una mayor expresión del canal en las célulastumorales que en las normales. Este resultado es altamente promisorioy constituye la base para continuar el estudio funcional del canal demanera de dilucidar si esta diferencia en la expresión se traduce enun rol funcional diferencial que nos permita proponerlo como un blancoespecífico para inducir la acidificación de la célula tumoral einducción de apoptosis, en concordancia con lo que previamentedemostramos en una línea celular proveniente de una leucemia humana detipo T, como son las células Jurkat