DIAGNÓSTICO DE PARATUBERCULOSIS BOVINA BASADO EN POLIPROTEÍNAS RECOMBINANTES

MOYANO RD; ALONSO N.; COLOMBATTI OLIVIERI MA; ROMERO MA; ALVARADO PINEDO, F.; TRAVERIA GE; ROMANO MI

Salta

Congreso; XI Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria; 2018

Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria

La paratuberculosis (PTB) es una enfermedad de los rumiantes producida por la infección con Mycobacterium aviumsubespecie paratuberculosis(MAP). El control de esta enfermedad se basa en la detección de los animales enfermos y su eliminación del rodeo. Actualmente, dentro de los diagnósticos más utilizados se encuentra el ELISA indirecto para detectar anticuerpos, utilizando un antígeno comercial la PPA3, que son proteínas protoplasmáticas de un extracto de MAP y se considera la prueba de oro el aislamiento de MAP a partir del cultivo de materia fecal. El principal problema que dificulta el aislamiento del agente a partir de muestras de materia fecal es la contaminación de los medios de cultivo por el largo período de incubación que requiere esta bacteria. Debido a esto la prueba de ELISA constituye una forma sencilla de detecta animales infectados, pero al no utilizar antígenos específicos se detectan animales infectados con otras micobacterias, principalmente con tuberculosis bovina. Estos inconvenientes de la prueba de ELISA para detectar animales con PTB, nos llevó a realizar la identificación de proteínas antigénicas específicas de MAP. En base a ellas se realizó el diseño de una poliproteínas recombinante que contiene fragmentos de los epitopes B, evaluados in silico. En este trabajo se comparó la prueba humoral utilizando como antígeno la poliproteína recombinante, con los resultados del cultivo de materia fecal y con el resultado del ELISA utilizando el antígeno comercial (PPA-3). En el presente trabajo se pudo observar que de los 94 sueros de animales positivos por cultivo, fueron positivos tanto con el ELISA utilizando como antígeno PPA-3 comercial, y con la poliproteína recombinante generada por el laboratorio. En cuanto a la especificidad 20 sueros de animales con tuberculosis no fueron detectados por el ELISA con la poliproteína recombinante al igual que los sueros negativos, en cambio los sueros de animales con tuberculosis fueron detectados con el ELISA PPA-3. En base a los resultados obtenidos podemos observar que la poliproteína recombinante generada en el laboratorio reconoce de manera efectiva los sueros de animales infectados con paratuberculosis sin dar reacción cruzada con los animales infectados con tuberculosis.