EVALUACIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE EN UN ENSAYO DE VACUNACIÓN CONTRA LA PARATUBERCULOSIS EN EL MODELO MURINO

COLOMBATTI OLIVIERI MA; MOYANO RD; SANTANGELO MP; ROMANO MI

Buenos Aires

Jornada; VI Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2016

Facultad de ciencias veterinarias

La Paratuberculosis (PTB) es una enfermedad crónica causada por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map). Considerando las pérdidas económicas que produce es necesario controlar la enfermedad y desarrollar una vacuna. Los ratones BALB/c son el modelo experimental de elección para un análisispreliminar de candidatos a vacunas. El objetivo fue evaluar la respuesta inmune de los animales vacunados con una cepa local virulenta (6611) e inactivada y con la vacuna comercial Silirum®. Se prepararó el inóculo vacunal con la cepa virulenta para el ratón (6611) que se evaluó como vacuna inactivada por calor, la cual fue administrada con adyuvante incompleto de Freund, llevado a la misma concentración que la vacuna comercial Silirum® (2,5mg pellet seco/ml). Se inocularon 0,2ml de la vacuna con una concentración de 0,5 mg/ratón, o solo PBScon adyuvante incompleto, por vía subcutánea a 15 ratones hembra BALB/c de 5-6 semanas de edad (5 animales por vacuna y 5 controles inoculados con PBS1x con adyuvante) y se les dio un refuerzo con la misma vacuna a los 17días. Al mes de la última dosis vacunal se sacrificaron y se procedió a la extracción suero, para medición de IgG e isótipos IgG2a e IgG1, y del bazo para medición de citoquinas (IL-2, IL-4, IL-6, IFNg, TNF, IL-17A e IL-10) de sobrenadante del cultivo de esplenocitos (5x105 células/well) los cuales fueron estimulados 16 y72hs con 10µg de PPD aviar o lisado de Map. Todos los animales vacunados con la cepa local presentaron granuloma post-vacunal a diferencia de los vacunados con Silirum® que solo en el 35% de los animales se observó granuloma. Los niveles de IgG en ambos grupos vacunados fueron similares con predominio de IgG1 (Th2).Los tipos de citoquinas producidos de manera significativa fueron los mismos para ambos grupos vacunados, a excepción de la IL-2 que solo se observó en animales vacunados con 6611. Las otras citoquinas fueron IL-4 e IL10, características de Th2 (antiinflamatoria), y las citoquinas proinflamatorias IL6 e IFNg que son características de un perfil Th1. Los resultados indican que, en el modelo murino, la cepa 6611 aplicada inactivada junto con un adyuvante oleoso sería capaz de conferir el mismo tipo de respuesta inmunológica que la vacuna Comercial Silirum® la cual tiene un perfil Th1 y Th2 con predominio de respuesta humoral.