Perfil de citoquinas en células de sangre periférica en respuesta a péptidos sintéticos del Virus de la Anemia Infecciosa Equina.

BAILAT A; SOUTULLO A; GARCÍA MI; VEAUTE C; GARCIA L; RACCA A; MALAN BOREL I

Santa Fe - Argentina

Congreso; XVII Reunión Científica Técnica de la Asociación Argentina de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico; 2008

Asociación Argentina de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico

El Virus de la Anemia Infecciosa Equina (VAIE), integrante de la familia Retroviridae, ocasiona una infección persistente en equinos que transcurre en tres etapas: aguda, crónica y asintomática. Durante esta última, la infección llega a un equilibrio en el cual la viremia es casi indetectable y no existe sintomatología, si bien el equino conserva de por vida su capacidad de infectar animales sanos. Los objetivos del presente trabajo fueron: evaluar la expresión constitutiva de citoquinas equinas (IL-12 (subunidad p40), IFN-alpha, IFN-gamma, IL-4 y TGF-beta), mediante RT-PCR semicuantitativa, en células mononucleares de sangre periférica (CMSP) provenientes de animales portadores inaparentes (VAIE (+)) y sanos (VAIE (-)). Además se evaluó la capacidad de dos péptidos sintéticos análogos a regiones conservadas de las glicoproteínas virales gp90 y gp45, de inducir un perfil de citoquinas capaz de colaborar en el control de la infección viral. Para esto último, se llevaron a cabo ensayos de linfoproliferación in vitro. Los resultados de la expresión constitutiva de citoquinas no mostraron diferencias entre ambos grupos de animales para IL-12p40, IFN-gamma, IL-4 y TGF-beta (p>0,05). Sin embargo, el grupo VAIE (+) presentó una disminución en los niveles constitutivos de ARNm de IFN-alpha (p<0,05) respecto del grupo VAIE (-). Luego del estímulo in vitro de CMSP con los péptidos sintéticos gp90 y gp45, se observó en los animales infectados, una fuerte asociación entre el índice de estimulación (IE) y los niveles de ARNm de IL-12p40 e IFN-gamma, luego de la estimulación con gp90 (r=0,894 y r=0,914, para IL-12p40 e IFN-gamma, respectivamente) y gp45 (r=0,991 y r=0,984, para IL-12p40 e IFN-gamma, respectivamente) (p<0,001). Los coeficientes de correlación (r) para las restantes citoquinas, tomadas de a pares fueron menores, siendo el mayor de ellos 0,592 (p>0,05). De esta manera no se observó correlación entre IFN-alpha, IL-4 y TGF-beta, o entre IFN-alpha, IL-4, TGF-beta y el IE, IL-12p40 ó IFN-gamma, luego del estímulo con ninguno de los dos péptidos. Los resultados expuestos permiten concluir que los péptidos sintéticos gp90 y gp45, fueron capaces de inducir una proliferación celular altamente correlacionada con niveles aumentados de citoquinas tipo Th1 en CMSP provenientes de equinos infectados con AIE. La respuesta proliferativa observada se asoció con la síntesis de ARNm de las citoquinas IL-12 e IFN-gamma detectada luego de la estimulación específica con dichos péptidos. Por otra parte, se observó que los niveles de ARNm de las citoquinas se encuentran mutuamente asociados en respuesta al péptido gp45, comportamiento que podría reflejar un factor de inmunodominancia de gp45 respecto de gp90. A partir de los resultados expuestos, y teniendo en cuenta las ventajas de las vacunas basadas en epitopes, las regiones representadas por los péptidos sintéticos ensayados podrían ser incluidas en futuras estrategias de vacunación contra el VAIE.