Comportamiento in vitro de especies de Malassezia frente a antifúngicos de uso clínico

GIUSIANO G; ROJAS F; CÓRDOBA S

Bilbao

Congreso; XII Congreso Nacional de Micología; 2014

Asociación Española de Micología

Las levaduras lipofílicas del género Malassezia han sido reconocido como miembro de la microbiota cutánea normal del hombre y otros animales. La mayoría de las especies son también lipodependientes y pueden actuar como agentes etiológicos o secundarios o exacerbadores de diversos desórdenes dermatológicos, pero también han sido asociadas a infecciones sistémicas. El documento M27-A3 elaborado por el CLSI para determinar la sensibilidad in vitro es aplicable al género Candida y Cryptococcus neoformans, pero no para Malassezia spp. Objetivo: determinar la sensibilidad in vitro de tres especies de Malassezia frente a antifúngicos de uso clínico. Materiales y Métodos: se estudiaron 39 Malassezia furfur, 20 M. sympodialis y 14 M. globosa previamente identificadas por PCR-RFLP. Se determinó la CIM según el documento M27-A3 con modificaciones, a fin de asegurar el crecimiento de estas levaduras. El medio RPMI 1640 fue suplementado con glucosa, sales biliares, peptona, extracto de malta, glicerol, Tween 40, Tween 80 y cloranfenicol. Las placas se incubaron a 32ºC y se realizó lectura visual a las 72 h. Se evaluó fluconazol (FCZ), itraconazol (ITZ), voriconazol (VCZ) y anfotericina B (AMB). Se calculó para cada antifúngico rango, media geométrica (MG), CIM50 y CIM90. Resultados: las modificaciones realizadas al método de referencia permitieron el desarrollo de estas levaduras lipodependientes. La lectura de la CIM pudo realizarse a las 72 h. Los rangos de CIM (µg/mL) obtenidos para M. furfur, M. sympodialis y M. globosa fueron: FCZ: ≤ 0,125- >64, ≤0,13-4 y ≤ 0,125-8; ITZ: ≤ 0.03-0.125, ≤0.03-0.06 y ≤ 0.03-0.06; VCZ: ≤0.03-0.5, ≤ 0.03-0.06 y ≤ 0.03-0.25; AMB: 0.25-8, 0.125-4 y 0.125-4. La MG (µg/mL) FCZ: 3.29, 0.58 y 0.56, ITZ: 0.04, 0.04 y 0.03; VCZ: 0.08, 0.04 y 0.06; AMB: 1.02, 0.56 y 0.5. M. furfur presentó las CIM50 y CIM 90 más elevadas frente a FCZ (4 y 16 µg/mL respectivamente) y AMB (1 y 2 µg/mL) Discusión: el medio RPMI-1640 suplementado permitió buen crecimiento de las 3 especies estudiadas y a las 72 h se obtuvo una lectura clara de la CIM. M. furfur, M. sympodialis y M. globosa mostraron diferentes perfiles de sensibilidad in vitro. M. sympodialis fue la especie más sensible y M. furfur la menos sensible. ITZ y VCZ fueron las drogas más activas y con poca variabilidad de CIM entre aislados de una misma especie. Por el contrario, FCZ y AMB mostraron algunos valores altos y mayor rango de dispersión.