Capacidad diagnóstica de la inmunodifusión en gel de agar frente a la técnica dot-blot como método de alta sensibilidad en la Paracoccidioidomicosis

CORREDOR L; CABEZA M; ROJAS F; MUSSIN J; GARCIA EFFRON G; GIUSIANO G

Santiago del Estero

Congreso; 2nd International Meeting of Endemic Mycoses ? 1st International Symposium of Implantation Mycoses (IMEMA-ISIM); 2023

Asociación Argentina de Microbiología

La Paracoccidioidomicosis (PCM) es una infección fúngica, sistémica y prevalente de Latinoamérica, siendo su agente etiológico Paracoccidioides spp. La detección de anticuerpos es una herramienta importante y rápida para llegar al diagnóstico de la PCM en cualquiera de sus formas clínicas. Al conocerse una nueva diversidad genotípica, cuando se identifica solo el antígeno Gp43, este inmunodiagnóstico puede perder su especificidad y sensibilidad y, como consecuencia, dar falsos negativos. Por otro lado, la sensibilidad de las diferentes metodologías también difiere entre ellas. Argentina posee dos regiones endémicas en el noroeste y noreste de país, las cuales han presentado cambios epidemiológicos en los últimos años. Los serotipos circulantes ya identificados difieren de la cepa con la cual se testean los sueros de los pacientes (Pb339 - P. brasiliensis PS3) y se ha detectado falsos negativos en alrededor del 17% de los casos probados microbiológicamente en los últimos años. El objetivo de este estudio fue analizar sueros de pacientes con PCM probada microbiológicamente y que por el método de inmunodifusión (ID) su resultado haya sido negativo con la técnica dot-blot, como método más sensible. Materiales y métodos Se estudiaron 18 sueros de pacientes con PCM probada que no mostraron reacción de identidad al ser evaluados por medio de la técnica de ID usando el antígeno de referencia P. brasiliensis B339 elaborado por el Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas “Dr. Carlos G. Malbrán”. Todos los sueros se encuentran depositados en la seroteca del Departamento de Micología del Instituto de Medicina Regional (IMR) de la Universidad Nacional del Nordeste, Argentina. Estos sueros se evaluaron a través del ensayo de dot-blot a partir de extractos de 10 cepas autóctonas de Paracoccidioides spp. ResultadosLos extractos de las 10 cepas autóctonas se normalizaron a través de una curva de calibrado a una concentración de 0.50 μg/μL. A partir de esto, se hizo reaccionar el lote de los 18 sueros por la técnica de dot-blot en diluciones 1/500, encontrándose que 18/18 (100%) de los sueros presentaron reactividad frente a los 10 extractos obtenidos. Conclusiones El tipo de técnica utilizada para el diagnóstico inmunológico de la PCM resulta clave para obtener un diagnóstico preciso. El dot-blot mostró una alta sensibilidad y especificidad respecto de la ID. Esta baja sensibilidad del método de ID puede deberse al tipo de antígeno empleado, a la cepa y genotipo utilizada para la obtención de antígenos, a la concentración de anticuerpos circulantes, pero también a las características propias de la técnica que la hacen menos sensible, incluyendo errores del operador.