Caracterización funcional de receptores de acetilcolina y GABA en células de retina de rata

FERNANDA GUMILAR; LUIS POLITI; CECILIA BOUZAT

Los Cocos, Córdoba

Congreso; XXII Reunión anual Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencias.; 2007

Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencias.

La retina coontituye un modelo de sistema nervioso central, ya que comparte con éste un mismo origen embrionario y presentmecanismos semejantes de transmisión de señales. Las células amarinas de retina de vertebrados son interneuronas cuyas funciones aín son poco claras. Tampoco han sido totalmente caracterizados los distintos receptores ni sus roles durante el desarrollo y la maduración celular. Nuestro objetivo es identificar funcionalmente los receptores GABA A y subtipos de receptores nicotínicos nueronales (AChR) en células amacrinas en cultivo. Realizamos registros de corrientes macroscópicas en cultivos de distintos días activando con nicotina, acetilcolina o GABA. No detectamos corrientes activadas por ACh o nicotina antes del dia 8 de cultivo. Después del día 8 detectamos dos tipos de respuesta a agonistas nicotínicos. Una lenta, evidenciada por corrientes con constante de decaimiento (td) del orden de 70 ms y otra rápida con td del orden de 10 ms. Esta última podría corresponder a AChR del tipo alpha 7. En el 80 % de células amacrinas detectamos corrientes activadas por GABA, que no decaen significativamente por desensibilización en presencia del agonista. Debido a que el receptor alpha7 es altamente permeable a iones Ca2+ utilizamos microscopía confocal y la sonda fluorescente Fluo-3/AM para evidenciar actividad de este receptor. La activación con nicotina o ACh reveló ingreso de calcio a células amacrinas. El bloqueo con un antagonista específico de alpha7 inhibió la señal. Nuestroe resultados muestran que este subtipo de neuronas presenta receptores alpha7 y GABA A y abre la puerta para estudiar los roles funcionales en la retina y sus posibles cambios durante el desarrollo.