Establecimiento de preñeces equinas mediante colapso y vitrificación de blastocistos expandidos (>900 µm) mediante un sistema novedoso de punción con microaguja en micropocillos

CLERICO, G.; RODRIGUEZ, MB; TAMINELLI, G; SANSINENA, M

Jornada; II Jornadas de Investigación UVA-AGRO-CRUP; 2020

Univ Moron / UVA CRUP Agronomía

La criopreservación del embrión equino es una herramienta importante para el diferimiento de los trasplantes embrionarios y su comercialización. Los reportes de preñeces logradas con embriones de diámetros ≥300µm son escasosa,b. Debido a que el lavaje (d 7-9 post-inseminación) resulta generalmente en blastocistos de gran volumen (500-2000 µm), es necesario un colapso total o parcial del blastocele para evitar cristalización durante el proceso de vitrificación. Este colapso, generalmente realizado mediante equipamiento complejo de micromanipulación, es de difícil implementación en condiciones de campo. El objetivo de éste ensayo clínico fue desarrollar un sistema de reducción de volumen embrionario sencillo y efectivo, que permita el colapso del embrión equino previo a la vitrificación. Para este ensayo, se obtuvieron un total de 6 embriones (1023  601 μm, 7 días post-inseminación) de yeguas de polo en buen estado corporal. Los embriones fueron asignados aleatoriamente: 1) colapso tradicional con microscopio y micromanipulador (tratamiento MM) y 2) colapso con sistema novedoso de inmovilización en micropocillos, punción con microaguja para diabéticos (NovoFine?, diamont needle, 32g) seguido de pipeteado en microcapilar (tratamiento MP). Los embriones colapsados fueron vitrificados en solución de 20% DMSO, 20% glicerol y 0.65M en sistema Cryoleaf? (Origio; Denmark), almacenados durante 12 meses a -196°C; luego calentados y trasferidos a receptoras. El colapso promedio del blastocele fue 81 y 90% del volumen embrionario inicial para el tratamiento MP y MM, respectivamente. Se observó un 50% de re-expansión en ambos tratamientos, indicando viabilidad embrionaria post-vitrificación. Se lograron establecer 2 preñeces viables con latido fetal a los 60, una con tratamiento MM (volumen inicial embrionario=920 µm) y otra con el tratamiento MP (volumen inicial=1050 µm). Estos resultados preliminares indican que este sistema novedoso permite el colpaso y establecimiento de preñeces en embriones equinos de gran volumen, representado una alternativa para implementación a condiciones de campo.