Microdominios de Membrana (RAFT): cambios estructurales durante la capacitación espermática y la fertilización

BOARELLI P; DE ROSAS J.C; MONCLUS M.A; VINCENTI A.E; FORNÉS M.W

Mendoza

Congreso; VIII Jornadas de Investigación de la Facultad de Ciencias Médicas; 2005

Secretaría de Ciencia y Técnica FCM, UNC

Los microdominios de membrana han sido demostrados en otros modelos celulares. Los lípidos asociados a estos microdominios; colesterol y esfingolípidos, tienen funciones específicas en el espermatozoide (E), por ejemplo, la pérdida de colesterol está involucrada en la capacitación espermática. No obstante, la distribución exacta de los lípidos de los raft durante la capacitación no está totalmente aclarada. Nosotros buscamos estos cambios en E de ratón. Además, estudiamos sus efectos en la fertilización. Los E fueronincubados en medio HMB (capacitante) y en HM (control), y posteriormente fijados y marcados: el colesterol por filipin III (FIII) y los esfingolípidos (GM1) por toxina colérica fracción b (bCT). FIII es fluorescente perse y bCT está conjugada con Alexa Fluor ®. Las muestras fueron procesadas por estudios de fluorescencia, observadas en un microscopio de fluorescencia. Los E (capacitación – control) poseen varios patrones de fluorescencia con FIII y bCT. Además, estos patrones podrías estar asociados con la fertilización. En ensayos de fecundación in vitro, bloqueamos los lípidos de los raft con FIII (colesterol) y bCT (GM1). En ensayos preliminares, el bloqueo de estos lípidos disminuye la union espermatozoide-ovocito. En el experimental (con bloqueo) la inhibición en la unión fue mayor que en el control (sin bloqueo), sin embargo estadísticamente no resultó altamente significativo.