Caracterización morfológica y funcional da la asociación de espermatozoides de roedor durante la maduración epididimaria

MONCLUS MA; CABRILLANA ME; BOARELLI PV; CESARI A; VINCENTI AE; FORNES MW

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

SAIB, SAFE, SAIC, SAB

Durante la maduración epididimaria, los espermatozoides (es)  de Rata y Ratón se asocian transitoriamente entre sí formando estructuras denominadas “Rosetas”. Estas constan de  decenas de (es) unidos entre sí  por sus cabezas y con sus colas libres hacia fuera. El fenómeno se produce a medida que los (es) inicialmente libres, progresan en su pasaje por el epidídimo, ya que sólo observamos Rosetas a partir del cuerpo distal y cola. Esta regionalización del fenómeno sugiere la influencia de factores “locales” que promueven la asociación reversible de los (es). Si realizamos una punción de la cola epididimaria y obtenemos una gota del contenido sobre medio de cultivo adecuado a 37 °C los (es)  gracias a su propia motilidad comienzan a desprenderse hasta disociar completamente la estructura. Caracterizamos morfológicamente las Rosetas en el Ratón mediante diversas técnicas de microscopía (óptica, video, TEM, SEM, inmunocitoquímica) observando que las cabezas se mantienen unidas por un material electrondenso, PAS (+) y reconocido por lectinas que marcas alfa D-Glucosa/Manosa. Iniciamos la caracterización del factor/res glicoproteico involucrado en Fluído Epididimario de Rata. Para ello perfundimos la cola del epidídimo con PBS y separamos el fluido por Cromatografía de Filtración (Sephacryl S200) obteniendo 4 fracciones de diferentes pesos moleculares. Probamos la capacidad de reproducir el fenómeno in vitro  incubando (es) mótiles y aislados por medio de Swim Up en cada una de las fracciones obtenidas. Mediante Cromatografía de Afinidad (Concanavalina A- Sepharosa 4B) continuaremos la purificación de la o las moléculas involucrada.En Ratón caracterizamos morfológicamente las Rosetas y determinamos su lugar de formación en las zonas mas distales del epidídimo, coincidiendo con trabajos previos realizados en Rata. De las fracciones proteicas aisladas del fluido epididimario de Rata, las 2 de mayor peso molecular lograron reasociar los (es) en Rosetas.