Capacitación y fertilización: dominios de membrana en espermatozoides de ratón (RAFT)

BOARELLI PAOLA VANINA; MONCLUS M.A.; VINCENTI A.E; FORNES MW

Mendoza, Argentina

Congreso; XIX Jornadas de Investigación de la Secretaría de Ciencia, Técnica y Postgrado. Universidad Nacional de Cuyo.; 2004

Secretaría de Ciencia, Técnica y Postgrado. Universidad Nacional de Cuyo.

La composición y la relación entre lípidos de membrana es crítica durante la espermatogénesis, maduración y capacitación. Mientras los esfingolípidos se redistribuyen durante la maduración, en la capacitación el colesterol se pierde. De trabajos previos surge la iniciativa de caracterizar los dominios membrana rafts presentes en los espermatozoides de ratón. Debido a la pérdida de colesterol se da inicio a la transducción de señales que lleva a la fundación en tirosina. Cabe entonces la pregunta: ¡si estuviesen los rafts presentes, sus componentes y distribución se modificarían durante la capacitación? Uno de nuestros objetivos es colocalizar los 3 componentes del raft: colesterol, esfingolípidos y proteínas asociada al raft (caveolina ¡) mediante técnicas de microscopía de fluorescencia y de ultraestructura. Mediante marcación específica de colesterol con filipina III, marcación del esfingolípido GM1 con toxina b colérica  y anti-caveolina ¡ (anticuerpo monoclonal para la proteína caveolina 1), previo tratamiento de permeabilización con estreptolisina o)estamos caracterizando los dominios de membrana. Procesando por microscopía de fluorescencia confocal  se observó caveolina 1 en la zona acrosomal del espermatozoide inmaduro, maduro y capacitado. La filipina se localizó tambien en la zona acrosomal dexcepto en espermatozoides capacitados. La toxina colérica se localiza en la zona postacrosomal luego de la capacitación. Como consecuencia hemos iniciado el estudio del probable papel de los rafts en la capacitación.