EFECTO DEL OSMOPROTECTOR TREHALOSA SOBRE LA RIZOBACTERIA BRADYRHIZOBIUM JAPONICUM ALMACENADA A LARGO TIEMPO Y SU CAPACIDAD DE CRECIMIENTO EN SOJA

NUEVA MURATORE L; N.S. PAULUCCI; CESARI A. B; DARDANELLI M.S.

Congreso; XXVI Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2023

Los bioformulados con bacterias promotoras del crecimiento vegetal, permiten el desarrollo de las plantas al mejorar la accesibilidad de nutrientes, controlar enfermedades y tolerar el estrés abiótico, al tiempo que minimizan el uso de insumos químicos sin afectar la productividad agrícola. Bradyrhizobium japonicum E109 es ampliamente utilizado debido a su habilidad para fijar nitrógeno en soja, mejorando la fertilidad del suelo y el rendimiento del cultivo. Los inoculantes líquidos pueden envasarse y almacenarse durante largos periodos de tiempo, pero los microorganismos tienden a sufrir estrés abiótico. Esto provoca un descenso de la población que interfiere con el éxito de la nodulación y la eficiencia de la simbiosis. La trehalosa (TRH) actúa como un agente protector contra diversos estreses ambientales manteniendo la integridad celular al proteger la estructura de las bicapas celulares y las proteínas inhibiendo su desnaturalización. A pesar de su uso generalizado, el mecanismo preciso de estabilización todavía se discute. El objetivo de este trabajo es comprender el efecto de la trehalosa sobre E109 almacenada a largo tiempo y su capacidad de promover el crecimiento de soja. Durante el desarrollo de la investigación se determinó la concentración de TRH más adecuada para mantener una mayor viabilidad en E109 en inoculantes líquidos y en semillas. Además, se estudió si la composición de ácidos grasos (AG) y la fluidez de la membrana bacteriana se veían modificadas por el almacenamiento mediante cromatografía gaseosa y anisotropía de fluorescencia respectivamente. Con el fin de comprender el efecto de TRH sobre la fluidez de vesículas multilamelares grandes se utilizó la técnica de anisotropía de fluorescencia. Por otro lado, se realizaron estudios de interacción simbiótica con soja (nódulos totales) con inoculantes con diferentes tiempos de almacenamiento. Los resultados mostraron que se pudo obtener mayor viabilidad de células en semillas de soja luego de 14 días a 28°C, cuando la bacteria fue previamente tratada con 300 mM de TRH comparado con 100 mM. La viabilidad de E109 luego de 4 meses mostró un comportamiento similar en los tratamientos control y con TRH. Para los ensayos de anisotropía de fluorescencia las vesículas con TRH manifestaron una menor polarización lo que se puede interpretar como un efecto fluidificante. Se observó que el efecto del almacenamiento en células control produjo mayor fluidez en las membranas de E109, mientras que con TRH tuvieron una menor variación de la fluidez en el tiempo. Los cambios en los AG demostraron una disminución en el grado de insaturación de lípidos de membrana plasmática de E109 almacenado durante dos meses. Por último, los ensayos en plantas mostraron que los formulados con TRH almacenados por 0, 1 y 3 meses presentaron una disminución del número de nódulos totales que los mismos almacenados sin TRH. En conclusión, en estos primeros ensayos se puede observar un efecto protector de TRH en vejigas y semillas.