Evaluación de la respuesta inmune inducida en ratones por virus Vaccinia Ankara Modificado recombinantes que expresan la glicoproteína gD de BoHV-1

FERRER MF, GHERARDI MM, TABOGA O, CALAMANTE G.

Buenos Aires

Congreso; IX Congreso Argentino de Virología; 2008

Asociación Argentina de Microbiología

Los poxvirus se utilizan eficientemente como vacunas seguras y efectivas contra enfermedades infecciosas. En particular, el uso de poxvirus recombinantes como vehículo seguro (vector viral no replicativo) para la expresión de antígenos foráneos e inmunomoduladores ha sido evaluado en numerosos ensayos clínicos de vacunas contra el cáncer, malaria, tuberculosis y sida. La cepa MVA (virus vaccinia Ankara modificado) es una cepa del virus vaccinia altamente atenuada, que no replica en la mayoría de las células de mamíferos, siendo un buen candidato para el desarrollo de vacunas a virus vivo no replicativo. El fenotipo atenuado de MVA es el resultado de numerosas mutaciones que particularmente afectaron a las proteínas que interactúan con el hospedador, a los genes con motivos tipo anquirina y a algunas proteínas estructurales. En nuestro laboratorio se obtuvo un virus MVA recombinante, denominado MVA-gDs, que porta y expresa una versión secretada de la glicoproteína gD del virus herpes bovino de tipo 1 (BoHV-1). El objetivo de este trabajo fue la evaluación de la capacidad inmunogénica del virus MVA-gDs recombinante en el modelo murino.En el caso de BoHV-1 el modelo murino es un modelo adecuado para comenzar los estudios de evaluación de las respuestas inmunes celulares y humorales, aunque no es modelo de estudio de protección frente al desafío viral. Para cumplir con el objetivo propuesto se realizó un ensayo donde se inmunizaron intraperitonealmente ratones Balb/c con una única dosis de poxvirus (recombinante o no recombinante) conteniendo 2 x 10E+07 unidades formadoras de placas. La inducción de respuesta inmune específica se evaluó a los 8 días post inmunización. Los sueros de los ratones inmunizados se evaluaron mediante la técnica de ELISA para la detección específica de anticuerpos anti-gD. La inmunización con el virus MVA-gDs indujo una respuesta inmune específica contra la glicoproteína gD, detectándose diferencias estadísticamente significativas (p = 0,029) entre la respuesta humoral específica inducida por el virus MVA salvaje y el virus MVA-gDs recombinante. La respuesta celular específica (células secretoras de IFN-gama) se evaluó mediante la técnica de ELISPOT en bazo. Los resultados obtenidos mostraron que en los esplenocitos provenientes de ratones inmunizados con MVA-gDs no se pudieron detectar células secretoras de IFN-gama frente a un estímulo específico para gD; sin embargo, hubo una respuesta celular significativa dirigida contra antígenos del vector (MVA). Los resultados de este trabajo permitieron determinar por primera vez la capacidad de los virus recombinantes MVA-gDs de inducir respuestas inmunes humorales específicas luego de una sola inoculación.Actualmente, se encuentra en curso otro ensayo en ratones para evaluar su capacidad inmunogénica en función del tiempo y número de dosis aplicadas.