CARACTERIZACIÓN PRELIMINAR DE LA VÍA TLR2 EN LA INFECCIÓN DE CÉLULAS HUMANAS POR VIRUS JUNÍN

CALDERONE M; THOMAS P; BACIGALUPO L; CARRERA SILVA EA; GOMEZ RM; FERRER MF

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Virologia; 2021

Sociedad Argentina de Virologia

Estudios previos realizados por otros han revelado que los arenavirus patógenos del Viejo Mundo inhiben la producción de citoquinas dependientes de TLR2 producidas en células murinas. Posteriormente se informó que el virus Junín del Nuevo Mundo (JUNV), el agente etiológico de la fiebre hemorrágica argentina, activaba esta vía en ratones después de la inoculación intracerebral.Con el objetivo de estudiar el rol de la vía TLR2 en células humanas, estudiamos la eventual activación de esta vía en células humanas A549 por 2 variantes de JUNV con diferentes propiedades patogénicas.Se sembraron células A549 con una confluencia del 80% en placas de 96 pocillos. Un día después, se añadió una mezcla de anticuerpos irrelevantes o anticuerpos bloqueantes anti-TLR2 a 5 g / ml (Invivogen, EE. UU.) 1 hora antes de la infección con la variante patógena P3441 (P) y la cepa vacunal Candid 1 (C # 1) a 1 MOI. Una hora más tarde, se retiró el medio, se añadió medio fresco y las células se incubaron durante 24 horas más a 37ºC en una incubadora gaseada con 5% de CO2. Luego, se recolectaron los sobrenadantes para analizar los niveles de IL-6 usando un ELISA (BioLegend) y los niveles de virus infeccioso por titulación mediante la técnica de formación de placas. Los resultados mostraron que la presencia de anticuerpos anti-TLR2 bloqueantes redujo los niveles de IL-6 cerca del 50% con ambos virus. Por el contrario, la producción de virus infecciosos se incrementó en las mismas condiciones. Actualmente estamos realizando experimentos adicionales para confirmar estos resultados preliminares. De confirmarse los mismos, planeamos analizar el rol de las proteínas individuales de JUNV en la activación de la vía TLR2.