ESTUDIOS PRELIMINARES SOBRE EL ROL DE LA DINÁMICA MITOCONDRIAL EN LA REPLICACIÓN DEL VIRUS DE LA FIEBRE AMARILLA

BACIGALUPO L; THOMAS P; CALDERONE M; CARRERA SILVA EA; GOMEZ RM; FERRER MF

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Virologia; 2021

Sociedad Argentina de Virologia

La Fiebre Amarilla (FA) es una enfermedad causada por el flavivirus homónimo (YFV). Como otros flavivirus, posee envoltura, simetría icosaédrica y un genoma de RNA monocatenario de polaridad positiva. Con el objetivo de estudiar el rol de la dinámica mitocondrial en la replicación de YFV, células A549 fueron infectadas con YFV a 1 MOI en presencia o ausencia de las drogas carbonyl cyanide m-chlorophenyl hydrazine (CCCP, Sigma), que estimula la mitofagia y de Mdivi-1 (Sigma), que inhibe mitofagia, ambas a concentración final 10 μM. A los 3 días posinfección, se cosecharon los sobrenadantes y las células, a las cuales se les realizó tinción con Mitotracker Orange M7510 (Thermo, EE. UU.). La titulación de la infectividad de los sobrenadantes por formación de placas en células Vero mostró que ambas drogas redujeron el número de partículas infecciosas (Mock 1,04x105, CCCP 1,8x104 y Mdivi-1 7,1x104 UFP/ml) aunque este efecto resultó significativo cuando se utilizó CCCP (p < 0.05, n = 4). Las células teñidas con Mitotracker se analizaron por citometría de flujo. A los 3 dpi, los resultados indicaron que la infección por YFV incrementa la intensidad de fluorescencia media (MFI) (0,13 a 0,5 UA, 2 n), siendo todavía más marcado en presencia de Mdivi-1 (0,23 a 0,51 UA, 2 n) que con CCCP (0,31 a 0,6 UA, 2 n). Se encuentra en curso un tercer experimento para confirmar estos resultados. En conclusión, la infección de células humanas por YFV produce un aumento del volumen mitocondrial celular mientras que la estimulación de la mitofagia por CCCP produce inhibición de la replicación. En futuros estudios nos proponemos averiguar los mecanismos y moléculas involucrados.