Rol de P300/CBP en carcinoma mamario

FERMENTO MARÍA EUGENIA; GRIOLI SILVINA MARIELA; GRAVINA ANABELA NOEL; SALOMÓN DÉBORA GISELE; ANDRÉS NANCY CAROLINA; GANDINI NORBERTO ARIEL; FACCHINETTI MARÍA MARTA; CURINO ALEJANDRO CARLOS

Congreso; XXVI Jornadas de Oncología; 2010

El p300 participa en una gran variedad de procesos biológicos tales como regulación del ciclo celular, apoptosis, diferenciación. Esta proteína funciona como co-factor transcripcional de varias proteínas. Estudios recientes demostraron su relación con procesos neoplásicos; sin embargo existe escasa información de su expresión en carcinomas mamarios. En trabajos previos realizados en nuestro laboratorio observamos una fuerte expresión e inusual localización citoplasmática de p300 en biopsias de tumores y líneas celulares de cáncer de mama. Dado que existen pocos estudios acerca del rol del p300 en cáncer de mama y a partir de nuestros resultados previos, los objetivos del presente trabajo fueron estudiar la expresión y localización subcelular de p300 en carcinomas mamarios humanos, y estudiar su asociación con la sobrevida de las pacientes. También evaluamos el efecto de inhibidores específicos de p300 sobre la proliferación/supervivencia celulares. Se estudió la expresión de p300 mediante tinción inmunohistoquímica de 70 carcinomas mamarios no invasivos y 8 glándulas mamarias normales. Se detectaron mayores porcentajes de expresión de p300 en los carcinomas (86 %) que en las glándulas mamarias normales (50%; Chi cuadrado, p=0.012). Además, la expresión de p300 fue significativamente menor en las regiones histológicamente normales adyacentes al tumor (RAN) que en la zona tumoral (ZT; Mann Whitney, p< 0.0001). En cuanto a la localización subcelular, en las RAN el p300 fue detectado exclusivamente en núcleo mientras que en las ZT se observó expresión citoplasmática en el 70% de los casos. En las muestras de glándulas mamarias no malignas el 100% de ellas presentaba p300 nuclear. El estudio de supervivencia mostró diferencias significativas asociadas con la expresión citoplasmática de p300, observándose una mayor sobrevida de los pacientes cuyos tumores presentaban localización citoplasmática (LogRank test, p=0,005). Posteriormente, evaluamos el efecto de inhibidores selectivos de p300 en la proliferación/supervivencia celular mediante ensayo WST con posterior conteo celular manual. Se observó que la inhibición de p300 inducía una disminución en la cantidad de células tanto en la línea de adenocarcinoma mamario murino LM3 como en cultivos primarios de explanto tumoral de un modelo de cáncer mamario en ratas (DMBA) (p< 0,05 en ambos casos). Se estudió por western-blot la expresión de algunas proteínas reguladoras de la apoptosis, observando que la inhibición de p300 no afectaba los niveles de p53, de caspasa 8 clivada y de fosfo-BAD. En conclusión, los resultados obtenidos en biopsias humanas muestran que la localización de p300 en los tumores es mayormente citoplasmática y que esta inusual localización se asocia a una mejor sobrevida de los pacientes. Por otro lado, los tratamientos in vitro demuestran que inhibidores del p300 inducen una disminución en la proliferación/supervivencia celular. En conjunto, los resultados sugieren que el p300 podría estar favoreciendo la proliferación celular en carcinomas mamarios y que su inhibición ya sea farmacológica o por localización subcelular alterada podría estar ejerciendo efectos antitumorales.