PRIMERA BIBLIOTECA DE SECUENCIAS DE REFERENCIA PARA PECES DEL RÍO PARANÁ INFERIOR.

DIAZ JUAN; VILLANOVA GABRIELA VANINA; FLORENCIA BRANCOLINI; ALEXIS GRIMBERG; FELIPE DEL PAZO ; ARRANZ SILVIA EDA

Congreso; CAL 6 VI Congreso Argentino de Limnología. Agua, Ambiente y Sociedad.; 2014

Introducción: La campaña del Código de Barras de la Vida de Peces (FISH-BOL) tiene por objeto establecer una biblioteca de secuencias estándar de referencia para la identificación molecular de peces en todo el mundo. Se ha propuesto la utilización de un fragmento del gen COI como un gen estándar universal para identificar la mayoría de las especies animales del mundo. Debido a que estas secuencias tienden a variar entre especies pero son relativamente invariables intra-específicamente, es posible utilizar una biblioteca de secuencias de referencia para inferir la identidad de un espécimen desconocido, comparando su secuencia con las secuencias depositadas en la biblioteca. Actualmente, el código de barras del ADN se ha convertido en una herramienta ampliamente utilizada para la identificación de especies en todo el mundo. En Argentina la utilización de esta herramienta es muy acotada, especialmente en peces de agua dulce, de los cuales se han identificado mediante este método solo 36 de las 438 especies conocidas. Para la ictiofauna del río Paraná Inferior, que es una de las más ricas y diversas del mundo, no existe hasta el momento este tipo de biblioteca. Debido a la escasa información molecular y a la importancia ecológica y económica de los peces del río Paraná, se hace imprescindible la utilización de estas nuevas herramientas para los estudios de la biodiversidad. Objetivo: En el presente estudio se propone reunir una biblioteca de secuencias de referencia y analizar la capacidad del código de barras genético (barcode) para identificar las especies de peces del río Paraná Inferior. Métodos: Se obtuvieron e identificaron taxonómicamente peces del río Paraná Inferior. Los especímenes fueron fotografiados y se le tomaron muestras de músculo y/o aleta y fueron depositados en el Museo Provincial de Ciencias Naturales Dr. Ángel Gallardo (MAG) de la ciudad de Rosario, Argentina. De cada muestra se extrajo ADN, se amplificó COI por PCR y se secuenció bidireccionalmente. Las secuencias obtenidas fueron analizadas utilizando herramientas disponibles en BOLD (www.boldsystems.org). Las distancias genéticas intra e inter-especificas se calcularon mediante el modelo de sustitución de dos parámetros de Kimura (K2P). El análisis de la distribución de la divergencia genética se llevo a cabo mediante el análisis de distancia de nearest-neighbor (NND). Para obtener una representación gráfica de los patrones de divergencia entre especies fue creado un árbol neighbor-joining (NJ) de distancias con el software MEGA v5.0. Resultados y Discusión: Un total de 73 especies pertenecientes a 70 géneros, 35 familias y 9 órdenes fueron muestreados e identificados mediante códigos de barra genéticos. 53 especies fueron representadas por más de un individuo (promedio 4 individuos/especie) alcanzando un total de 302 secuencias COI. La distancia genética media entre especímenes fue de 0,46% dentro de cada especie, 11,12% dentro de géneros y 19,88% dentro de familias. El análisis de la distancia media mostró que la variación genética entre congéneres es 24 veces más pronunciada que entre individuos de la misma especie. Esta brecha en la distancia permite asignarles pertenencia especie específica a los distintos individuos con un alto grado de confiabilidad. Nuestros resultados indican que el código de barras de ADN puede ser utilizado para la identificación del 100% de las especies analizadas, y constituye la primera biblioteca de secuencias de referencia para peces del río Paraná Inferior. Además, se generó una biblioteca de tejidos y sus respectivos ejemplares voucher, que se sumaron a la Colección Ictiológica del MAG.