La unión de ARN por HYL-dsRBD1 es necesaria para su función in vivo

BURDISSO, PAULA; MILLIA, FERNANDO; BOLOGNA, NICOLAS G.; MATEOS, JULIETA; PALATNIK, JAVIER F.; RASIA, RODOLFO M.

Buenos Aires

Congreso; XL Sociedad Argentina de Biofísica (SAB); 2011

HYL1 es una proteína de unión a ARN doble hebra involucrada en el procesamiento de micro ARN en plantas. Se ha establecido que las funciones de HYL1 son incrementar la eficiencia y precisión de la ARNasa III DCL1, que lleva a cabo el procesamiento de los precursores de miARN y participar en la selección de la hebra correspondiente al miARN. Sin embargo, el mecanismo por el cual HYL1 lleva a cabo sus funciones es desconocido hasta el momento. En este trabajo, evaluamos las contribuciones de los dos dominios de unión a ARN para unirse a sus moléculas blanco. Encontramos que el primer dominio es el que contribuye principalmente a la unión del ARN. El mapeo de las regiones de interacción por resonancia magnética nuclear en la estructura de los dominios de unión a ARN de HYL1 mostró que la diferencia en las capacidades de unión pueden ser atribuídas a la divergencia en el bucle. Con el objetivo de analizar la relevancia de cada una de las regiones de interacción mapeadas, se construyeron distintas mutantes, las cuales fueron evaluadas in vitro para verificar que mantuvieran su estructura y medir su afinidad por ARN, e in vivo, transformando plantas de Arabidopsis thaliana deficientes en hyl1 y observando reversión del fenotipo. Estos resultados, podrán servir como base para futuras investigaciones que busquen establecer la función molecular de HYL1 en la biogénesis de mi ARN en plantas.