EFECTO DE LA SOBREEXPRESIÓN DEL EXTREMO C-TERMINAL DE FAEXP2 EN PLANTAS DE A. THALIANA

CRISTINA F. NARDI; GUSTAVO MARTINEZ; MARCOS CIVELLO

La Plata

Congreso; RAFV; 2010

SAFV

Las expansinas son proteínas de pared celular sin actividad hidrolítica conocida, con capacidad de provocar la extensión de paredes celulares aisladas. FAEXP2 codifica para una expansina putativa en frutilla (Fragaria x ananassa) y posee dos dominios predichos: un dominio expansina en su extremo N-terminal y un dominio de unión a carbohidrato (FACBM) en su extremo C-terminal. Este último se  fijaría al sustrato mientras el dominio expansina relajaría la pared celular permitiendo el acceso de enzimas a sus sustratos. Para evaluar el efecto de la sobreexpresión de FACBM en la pared celular, se realizó una construcción en el plásmido binario cTAPi, fusionando el péptido señal de la expansina 8 de A. thaliana con FACBM. Se transformaron  plantas de A. thaliana por el método de inmersión floral y las semillas transgénicas fueron seleccionadas con el herbicida BASTA®. Se determinó el contenido cualitativo y cuantitativo de almidón y se analizó el contenido total de pared celular a través de la determinación de residuo insoluble en alcohol (RIA) tanto en plantas sobreexpresantes de FACBM  como en plantas no transformadas. En el primer caso no se observó tinción con lugol, a pesar de haber obtenido igual contenido de almidón que en las plantas tipo salvaje. Además, se obtuvo un mayor contenido de RIA en las plantas transgénicas en comparación con las tipo salvaje. Estos resultados sugieren que la sobreexpresión de FACBM en A. thaliana produciría una alteración en la pared celular, aumentando el contenido total de la misma y bloqueando el ingreso de colorante a las células.