Caracterización de la microflora intestinal de Apis mellifera mediante High Resolution Melting (HRM) y secuenciación

DI MEGLIO, L.G.; DI GERÓNIMO, V.; QUINTANA, S.; GENDE, L. B.

Congreso; XII encuentro de Biólogos en RED; 2017

La flora microbiana presente en el intestino de los insectos cumple funciones tanto a nivel delindividuo, como a nivel ecológico y evolutivo. La misma participa en la asimilación de nutrientes, enla respuesta inmune e incluso tiene efecto sobre el comportamiento. Descripto como uno de losgrandes reservorios de diversidad microbiana escasamente caracterizados, el intestino de las abejasaloja una numerosa comunidad de bacterias simbiontes. El objetivo del presente trabajo consistió encaracterizar la flora microbiana predominante del intestino medio de Apis mellifera mediante HighResolution Melting (HRM) y posterior secuenciación. Lo propuesto se llevó a cabo a partir de coloniasaisladas de diferentes medios de cultivo específicos para bacterias y hongos, utilizando abejaspecoreadoras y nodrizas. Se efectuaron amplificaciones por PCR en tiempo real correspondientes aun fragmento del gen codificante para el ARNr 16s (bacterias) y para los espacios intergénicosribosomales (ITS) de hongos y se realizó un análisis de HRM. Los amplicones que presentarondiferentes perfiles de melting fueron secuenciados e identificados por afiliación taxonómica medianteanálisis bioinformático con el programa BLAST (Basic Local Alignment Search Tool). A partir de esteestudio se identificaron representantes bacterianos afiliados con los géneros Citrobacter,Enterobacter y Staphylococcus. Entre los hongos aislados se identificaron organismos afiliados a losgéneros Candida, Cladosporium y Hanseniaspora. En conclusión, se consiguió aislar y caracterizarintegrantes de la flora intestinal de A. mellifera. Por otra parte, se distinguieron mediante HRM losamplicones de aquellos aislados con distinta secuencia nucleotídica. La implementación de la técnicade HRM como método de screening resultó eficiente en este campo de investigación.