Estudio de la maquinaria endocítica en neuronas estriatales y su relación con la vulnerabilidad celular

GIL CASTRO, ANA CLARA; SOSA, M.; TRONCOSO M.

Mendoza

Jornada; XXIV Jornadas de Investigación y VI Jornadas de Posgrado Universidad Nacional de Cuyo; 2016

Universidad Nacional de Cuyo

La endocitosis mediada por vesículas cubiertas con clatrina (CCVs) es un proceso crucial para el mantenimiento de la integridad neuronal. El ensamble de la cubierta de las CCVs es regulado por proteínas adaptadoras, entre las que se encuentra AP2, una proteína heterotetramérica formada por las subunidades α, β2, μ2 y 2. En el tejido nervioso se han descripto dos isotipos de α; α1 y α2, y su co-existencia aún no ha sido explicada. AP2 participa en el reconocimiento de proteínas cargo e induce el reclutamiento y polimerización de moléculas de clatrina y el ensamblaje de proteínas accesorias de la cubierta.Objetivos: Estudiar el comportamiento de ambas subunidades α en neuronas, en modelos animales o en líneas celulares, sometidos a diferentes condiciones de excitotoxicidad. Metodología: cultivoscelulares; drogas(ácido quinolínico agonista del NMDA-R) y AP7 antagonista del NMDA-R), IFI,electroforesis y western blot. En cuanto a la distribución y capacidad de unión en la fracción membranosa vs la fracción citosólica de las isotipos(α1y2) de la subunidad α de AP-2 en células StHdh Q7 y Q111 control (sin tratar) y tratadas con AQ durante 3 y 6 hs. en células Q7 se observó un aumento de α1y2 de AP2 en la fracción membranosa de las células Q7 a las 6hs de tratamiento con AQ. La distribución de α2 en células tratadas y sin tratar fue citosólica. En células Q111hubo un aumento de α1y2 de AP2 en la fracción membranosa a las 6hs de tratamiento con AQ.La IFI reveló un cambio en la distribución de AP2 en ambos tipos celulares en tres diferentes condiciones:1) control;2) condición excitotócica (tratamiento con AQ)y 3)reversión de la condición excitotóxica(tratamiento con AP7). Se observó que en las condiciones 1y3 la distribución de αAP2 son similares(citoplasmática).Para la condición 2 la distribución de AP2 se vió de forma dispersa en células Q7y aglutinada cerca del núcleo en células Q111.Nota: este resumen aparece en la página 181 del libro de resúmenes adjuntado.