Las células dendríticas requieren células adicionales de médula ósea para constituir vacunas eficientes contra el melanoma murino B16 F1

MALLERMAN J.; MAC KEON S.; GAZZANIGA S.; MORDOH J.; WAINSTOK R.

Mar del Plata

Congreso; LIII REUNION CIENTIFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) REUNION CIENTIFICA Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Se demostró que la vacunación con células dendríticas (CD) provenientes de médula ósea cargadas con células tumorales apoptóticas (CD/Apo) en ratones singeneicos induce inmunidad alargo plazo contra el melanoma murino B16, dependiente de la acción combinada de linfocitos T CD4+ y CD8+ (J. Immunol. 2003; 171, 5940). Continuando con este trabajo, nuestro propósito fueevaluar si las CD son las responsables exclusivas de la protección, o si participan otras células de la médula ósea. Para ello, a partir de CDs inmaduras de 7 días de cultivo con GM-CSF se aislaronpor selección positiva las CD CD11c+ y/o mPDCA+, utilizando columnas con microesferas magnéticas (Miltenyi Biotech). Del total de CDs obtenidas, las aisladas por selección positiva constituyeron 47 ± 11 %. Luego de la selección las células adheridas a la columna (CD+) y las eluídas (CD-) fueron caracterizadas a través de los marcadores CD11c, F480, CD14, CD80, CD86 y CD8a, observándose mayor expresión en las células adheridas. Las fracciones CD+ y CD- fueron cocultivadas con células apoptóticas de melanoma B16, originando vacunas CD+/Apo y CD-/Apo, respectivamente. Se inmunizaron s.c. tres grupos de 10 ratones cada uno con 4 dosis semanales de 2x105 CD/Apo, CD+/Apo o CD-/Apo, y un grupo control recibió PBS. A la quinta semana se realizó el desafío con 13.000 células B16 viables. En todos los animales vacunados se observó un significativo retraso temporal en la aparición de tumores respecto del grupo control. La protección obtenida luego de 75 días fue: 50% CD/Apo, 20% CD-/Apo y 0% CD+/Apo y PBS, siendo la protección alcanzada sólo significativa con la vacuna CD/Apo (p=0,012). Se concluye que para obtener mayor protección antitumoral se requiere interacción entre las CD y otras células provenientes de médula ósea.