Efecto de la hípertonicidad del medio extracelular sobre las células de túbulo colector en desarrollo. Caracterización del modelo de estudio

MEGÍAS, FRANCO EXEQUIEL; VALLS JERÓNIMO; GUAYTIMA EDITH; BRANDÁN YAMILA ROMINA; MÁRQUEZ MARÍA GABRIELA

La Rioja

Jornada; X JORNADAS DE CIENCIA, TECNOLOGIA Y ARTE CIENTIFICO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA RIOJA 2016; 2016

Universidad Nacional de La Rioja

Una característica de los riñones de mamíferos es la hipertonicidad del fluido intersticial de la papila renal, que induce y mantiene la maduración de las células epiteliales del túbulo colector (TC). El objetivo general es caracterizar los cultivos primarios de células del TC de la papila renal de ratas neonatas, teniendo en cuenta la tonicidad del medio extracelular. En una primera etapa se estudió el modelo experimental analizando el grado de diferenciación de las células de TC de papila renal, en condiciones basales y de hipertonicidad. Para imitar la isotonicidad de las papilas neonatales, y la hipertonicidad de las adultas presente en el tejido intacto, las células se mantuvieron en medio de cultivo comercial, o con el agregado exógeno de NaCl, respectivamente. Se realizó una caracterización morfológica analizando el citoesqueleto, estructuras de adhesión celular, y características de glicosilación, mediante inmunicitoquímica. Se observaron colonias formadas por un número variable de células y distinto grado de asociación, con un nivel de heterogeneidad considerable. Las de mayor grado de madurez unieron la lectina DBA pero no BSL-I, presentaron bordes delimitados con E-cadherina y α-catenina, filamentos intermedios formados por citoqueratina pero no por vimentina, y un córtex de actina. Contrariamente, las células menos diferenciadas no presentaron estas características. Las células sometidas a hipertonicidad exhibieron nucleolos más evidentes -reflejando un aumento de la actividad transcripcional-; y características compatibles con células de TC con mayor estado de diferenciación. Concluimos que: 1) las células de TC en cultivo primario presentan un alto grado de heterogeneidad madurativa, y 2) la hipertonicidad induce sobre este mismo tipo celular la adquisición de un fenotipo epitelial, reflejando así la capacidad que poseen las células del TC in vitro de comportarse como lo hacen en el tejido intacto