Cambios en el perfil de glicosilación de cardiocitos murinos por la infección con Trypanosoma cruzi

BENATAR, A; GARCIA, GA; STUPIRSKI, JC; TASSO, LM; TOSCANO, MA; BUA, J; RABINOVICH, G; GOMEZ, KA

Mar del Plata

Congreso; IX Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias.; 2011

Soc. Argentina de Protozoologia

Cambios en el perfil de glicosilación de cardiocitos murinos por la infección con Trypanosoma cruzi. Alejandro F. Benatar, Gabriela A. Garcia, Juan C. Stupirski, Laura M. Tasso, Marta A. Toscano, Jacqueline Búa, Gabriel A. Rabinovich, Karina A. Gómez El patrón de glicosilación de proteínas de superficie es modificado por la acción de glicosidasas y glicosiltransferasas frente a diversos estímulos. Este fenómeno es relevante en una amplia variedad de procesos biológicos, ya sea por la función de los glicanos per se o, por funciones relacionadas al reconocimiento de la estructura sacarídica por lectinas endógenas, como por ejemplo las galectinas. Las galectinas son una familia de proteínas que se unen a múltiples residuos N-acetil-lactosamina presentes en N- y O-glicanos de diferentes proteínas de membrana, y actúan como moléculas reguladoras de la homeostasis del sistema inmune y de la respuesta inflamatoria. Una de las manisfestaciones más severas de la infección por T.cruzi es la Cardiopatía chagásica crónica (CCC). Se sabe que el parásito no sólo puede modificar el grado de sialilación de cardiocitos, sino también que cardiocitos con anomalías en la glicosilación, presentan alteraciones en la conductividad eléctrica y excitabilidad; signos característicos que se presentan en los pacientes con CCC. En base a estos hallazgos, el objetivo del trabajo fue evaluar los cambios en el perfil de glicosilación de células cardiacas murinas de la linea HL-1 ante la infección con tripomastigotes de las cepas Tul-2 y Brazil. Luego de 2 y 5 días post-infección, la presencia de diferentes glicanos en la superficie celular se determinó mediante el uso de lectinas fluorescentes, por citometría de flujo. Los resultados mostraron que, en los cardiocitos infectados, independientemente de la cepa de T.cruzi, hubo una disminución de la unión de la lectina PHA-L, indicando una reducción en el número de N-glicanos complejos ramificados en uniones 1-6. Las células infectadas con la cepa Tul-2, tanto a los 2 como a los 5 días, mostraron un aumento en el contenido de ácido siálico con enlaces 2-6 (tal como lo revela la tinción con la lectina SNA), junto con una disminución de los niveles de N-acetil-lactosamina (tal como lo evidencia la tinción con LEL). Los cardiocitos infectados con la cepa Brazil presentaron un aumento de la sialilación de sus N-glicanos, unidos en 2-3, así como una pérdida de N-acetil-lactosamina; y a los 5 días post-infección se detectó una disminución de la unión de galectina-1. Además, observamos un aumento en los niveles de galectina-1 en suero de pacientes en fase indeterminada (n=9, P=0,0035) y con CCC (n=19, P=0,0001), comparado con sueros de individuos sanos (n=42). Estos datos sugieren que la interacción entre galectina-1 y sus glicanos específicos podría tener un papel clave en la CCC.