Anticuerpos monoclonales anti-Tirosina aminotransferasa y Glutation-S-transferasa del Trypanosoma cruzi preparados a partir de la inmunización con la proteína de fusión EP46/9

GARCIA, GA; BUA, J; PORCEL, B; BONTEMPI, EJ; SEGURA, EL; RUIZ, AM

Catamarca, Argentina

Congreso; IV Congreso Regional de Protozoología, XX Reunión de Investigadores de Chagas; 1993

Sociedad Argentina de Protozoologia

Un mejor conocimiento de la composición molecular del T. cruzi  permitirá el diseño de nuevas herramientas para atacar al parásito, como reactivos de diagnóstico,  una inmunoprofilaxis efectiva y  drogas de baja toxicidad.   La proteína recombinante EP46/9 expresada en el plásmido pGEX1 esta conformada por la porción carboxiterminal de la Tirosina-aminotransferasa (TAT) del parásito, proteína de 46 kDa (Bontempi y col.Mol Bioch Parasitol, 59, 253-262, 1993) involucrada en reacciones de transaminación de la gluconeogenesis y la Glutation-S-transferasa (GST) de 26 Kda de Schistosoma japonicum  también presente en el T. cruzi (Gruber y col., Memorias do Instituto Oswaldo Cruz  87 suppl. II, 131, 1992). En este trabajo se describe la producción de anticuerpos monoclonales contra EP46/9, a los efectos de su caracterización e identificación de los diferentes epitopes presentes en la molécula. Dos  anticuerpos fueron seleccionados: 2A11E4 y 2C5D6. El 2A11E4 (IgM) reaccionó con GST de S. japonicum  y epimastigotes de T. cruzi  reconociendo en este último, varias moléculas de alto peso molecular. Se observó reactividad del anticuerpo sobre la membrana del parásito por inmunofluorescencia (IFI). El 2C5D6 (IgG1) se une a la TAT purificada de T. cruzi. En IFI muestra fluorescencia citoplasmática. Este anticuerpo fue capaz de reconocer una de las proteínas de T. cruzi  capaz de unir glutation (Glutathione binding proteins, GBP) con un peso molecular de 43.6 kDa. Estos resultados muestran que los AcMo obtenidos a partir de EP46/9 pueden ser una buena herramienta para el estudio  de las proteínas del parásito (TAT y GST), tanto desde el punto de vista de función y localización celular, como desde el punto de vista antigénico y posible purificación de las mismas por inmunoafinidad.