La ciclofilina de 19 kDa (TcCyP19) secretada por Trypanosoma cruzi interfiere en el ingreso del parásito en la célula hospedera

ANTOLA, MB; GARCIA, GA; BUSTOS, PL; PERRONE, A; PERALTA, P; FUCHS, AG; BUA, J

Mar del Plata

Congreso; IX Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias.; 2011

La ciclofilina de 19 kDa (TcCyP19) secretada por Trypanosoma cruzi interfiere en el ingreso del parásito en la célula hospedera. María Belén Antola1,2, Gabriela A. García1, Patricia Bustos1, Alina Perrone1, Pablo Peralta2, Alicia G. Fuchs1,2 y Jacqueline Bua1,2. 1. Instituto Nacional de Parasitología “Dr. Mario Fatala Chabén, ANLIS C.G. Malbrán. Paseo Colón 568. (1063). 2. CAECIS, Universidad Abierta Interamericana, Buenos Aires. Ha sido documentado que varias proteínas parasitarias, entre ellas mucinas, TS, proteasas, están involucradas en el proceso de invasión de Trypanosoma cruzi a la célula de mamífero). En nuestro laboratorio hemos estudiado una proteína de ubicación citosólica que el parásito secreta al espacio extracelular, la ciclofilina de 19 kDa del T. cruzi, (TcCyP19). Con el objetivo de analizar si esta proteína tiene algún rol en la infección celular, pre-incubamos dos horas monocapas de células VERO con 4.5 g/ml de TcCyP19 recombinante, y posteriormente infectamos la monocapa con tripomastigotes de cultivo de la cepa Tulahuén en una relación 5:1 (parásitos:células) durante toda la noche. Como control se utilizó la trypanotiona reductasa recombinante (TR), una enzima de T. cruzi que no participa de la infección y que posee un “tag” de histidinas como la TcCyp19 recombinante. Al tercer día post-infección el porcentaje de células infectadas en los cultivos pre-incubados con TcCyP19 disminuyó un 63.6 %, siendo este porcentaje dependiente de la concentración de proteína agregada. Por otro lado, no se evidenció efecto alguno al adicionar distintas concentraciones de la TR. Cuando se agregó a las células VERO la TcCyP19 pre-incubada con ciclosporina A, el inhibidor de su actividad enzimática peptidil-prolil cis-trans isomerasa, o con sueros anti-TcCyP19, el efecto inhibitorio de la infección de la TcCyp19 fue parcialmente anulado. Estos resultados indican que la inhibición de la infección sería mediada por una interacción proteína-célula y que, posiblemente, el sitio activo de la TcCyP19 estaría involucrado. Ampliamos nuestros estudios a la línea celular cardíaca de ratón HL-1, en la que también se observó una disminución significativa de la penetración de los tripomastigotes de la cepa Brazil, luego que la TcCyP19 interactuara con los cardiocitos. Concluimos que la ciclofilina de 19 kDa del T. cruzi, cuya función se desconoce en todos los Trypanosomátidos, se adhiere a la célula del mamífero impidiendo parcialmente que los tripomastigotes penetren en las células de mamífero estudiadas. Postulamos que esta proteína, secretada por el mismo parásito, podría regular negativamente su invasión celular, preservando alguna integridad en los tejidos que infecta y asegurando de este modo su propia supervivencia.