Posible rol de la aldo-ceto reductasa de Trypanosoma cruzi (TcAKR) en la activación del benznidazol y su modo de acción tripanocida

GARAVAGLIA, PA; CANNATA, JB; GARCIA, GA

Mar del Plata

Congreso; X Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2014

Sociedad Argentina de Protozoologia

El Benznidazol (Bz) es un compuesto nitro-heterocíclico que debe ser reducido para activarse y ejercer su efecto citotóxico. Si bien esta droga se ha utilizado desde los años 60 para el tratamiento de la enfermedad de Chagas, su mecanismo de acción no ha sido totalmente dilucidado. Hasta el momento, la nitroreductasa tipo I, especifica para NADH, es la única enzima descripta de T. cruzi involucrada en la activación del Bz. Sin embargo, varios trabajos sugieren la participación de otras reductasas. Nuestro grupo identificó y caracterizó una aldo-ceto reductasa, NADPH dependiente, de T. cruzi (TcAKR) que posee actividad de AKR y de quinona-oxido reductasa, cuya actividad específica en presencia de Bz como sustrato al utilizar TcAKR recombinante fue de 104.5 nmoles NADPH/min/mg. Por otro lado, recientemente Trochine y col. describieron que la TcAKR interacciona con Bz inmovilizado, sugiriendo su participación en la activación de la droga. Con el objetivo de establecer una posible relación entre la TcAKR y la susceptibilidad al Bz, se evaluó la expresión de esta enzima por ?western blot? y actividad enzimática en dos cepas de parásitos con diferentes susceptibilidades a esta a droga. La evaluación del Bz sobre epimastigotes de la cepa Nicaragua (DTU I) y del clon CL Brener (DTU VI) de T. cruzi mostró un IC50 de 20.8 µM y 10 µM, respectivamente, corroborando que el clon CL Brener es más susceptible. Por otro lado, la evaluación de la expresión de la TcAKR sobre ambas cepas por ?western blot? con un suero anti-TcAKRrec, mostró que el clon CL Brener posee 1,9 veces más cantidad de TcAKR que la cepa Nicaragua y, en correlación, la actividad específica evaluada con Bz fue significativamente mayor (20.4 nmoles NADPH/min/mg en clon CL Brener vs 8.25 nmoles NADPH/min/mg en Nicaragua).Nuestros resultados demuestran que la TcAKR puede reducir al Bz y además, sugieren que esta enzima podría participar en el mecanismo de acción tripanocida de dicha droga.