Rol de la aldo ceto reductasa de Trypanosoma cruzi, TcAKR, en la resistencia al Benznidazol: Estudios de inhibición enzimática

GARAVAGLIA, PATRICIA ANDREA; TASSO, LAURA MÓNICA; SCOTTI JULIAN; BAUTISTA CANNATA, JOAQUÍN JUAN; GABRIELA ANDREA GARCIA

Buenos Aires

Congreso; XXXIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

Sociedad Argentina de Protozoología

Tanto nifurtimox (Nx) como benznidazol (Bz) han sido utilizados por más de 40 años para el tratamiento de la forma aguda de la enfermedad de Chagas, producida por el agente etiológico Trypanosoma cruzi. Sin embargo, aún no es claro el mecanismo de acción de dichos compuestos. Hasta el momento la nitroreductasa de tipo I, es la única enzima validada como activadora de dichas drogas. No obstante, en nuestro laboratorio hemos identificado y caracterizado la aldo-ceto reductasa (AKR) de T. cruzi (TcAKR), una enzima NADPH dependiente capaz de interactuar con el Bz y reducirlo. Estudios con parásitos que sobre-expresan esta enzima sugieren su participación en la resistencia al Bz. Con el fin de validar dicha participación en este mecanismo se planteó como estrategia la inhibición farmacológica de la TcAKR.Para ello, se evaluó el efecto inhibitorio de los siguientes compuestos: Quercetina, Ác. Flufenámico, Fenolftaleína y Menadiona, sobre las actividades AKR (sustrato: 4-NBA) y quinona-óxido reductasa (QOR) (sustrato: 1,2-NQ) de la TcAKR. La Quercetina y el Ác. Flufenámico fueron los inhibidores más potentes obteniendo entre 100 y 47.5% de inhibición, respectivamente; en presencia de una concentración 100 µM de dichos compuestos. Ambos mostraron una inhibición No competitiva de la actividad AKR, con constantes de inhibición (Ki) de 8,7 ± 0,68 µM y 35,04 ± 3,62 µM, respectivamente. En cuanto a la actividad QOR de la TcAKR, cuya cinética es sigmoidea, las concentraciones inhibitorias 50 (IC50) de la Quercetina y el Ác. Flufenámico fueron 3,36 ± 0,3 y 51,36 ± 1,22 µM, respectivamente.Por otro lado, una concentración 5 µM de Quercetina logró disminuir el IC50 para el Bz de epimastigotes transfectados que sobre-expresan la TcAKR de 17,45 a 9,9 µM, equiparando el valor de IC50 de los epimastigotes wild type.Este resultado es un nuevo indicio de la participación de la TcAKR en los mecanismos de resistencia al Bz, posiblemente a través de la detoxificación de esta droga.