Primer mapa intraviral de las interacciones proteína-proteína del virus de la Hepatitis E

OSTERMAN, A.; STELLBERGER, T.; BAIKER, A.; NITSCHKO, H.; VIZOSO PINTO, M. G.

Ciudad Autónoma de Bs As

Jornada; XXIII Reunión Científica Anual De la Sociedad Argentina de Virología; 2013

Soc. Arg. de Virología

La Hepatitis E es una enfermedad aguda que se transmite por vía fecal-oral y generalmente es autolimitante pero que en embarazadas está asociada a una elevada mortalidad (aprox. 20-30%). Su agente etiológico es un virus ARN monocatenario positivo (+ssRNA) no envuelto cuyo genoma es aprox. 7,2 kB y pertenece a la familia Hepeviridae. Debido a la falta de un modelo animal pequeño y a las dificultades de propagar el virus en cultivos celulares, se conoce relativamente poco sobre su biología y patobiología. El sistema híbrido de dos levaduras (Y2H) permite detectar interacciones binarias de proteínas fusionadas a DBD (DNA Binding Domain) y al dominio AD (Activation domain) de un transactivador en levaduras. De esta forma, cuando ambas proteínas interactúan entre sí, el factor de la transcripción se reconstituye y se activa el gen reportero que le permite crecer en condiciones selectivas utiiando una cepa auxotrófica para levaduras. Utilizamos un monitoreo en matriz para evaluar las interacciones binarias entre todas las proteínas del genoma del virus de la hepatitis E (HEV) con fusiones N y C-terminales para incrementar la especificidad. Mediante el mismo describimos por primera vezel interactoma completo de HEV utilizando Y2H y a si vez como vaidación del ensayo pudimos confirmar interacciones ya descriptas en la literatura como por ejemplo ORF2-ORF2 y ORF2-ORF3. En estudios futuros nos promponemos valida este mapa con otras tecnologías de detección de proteína-proteína. Este tipo de datos son muy útiles porque aquellas interacciones esenciales para el ciclo viral pueden ser usadas como banco para el diseño inteligente de agentes antivirales.