Corticotropinomas: un desafío diagnóstico y terapéutico. Avances en el estudio de la vía de señalización de receptores notch

BERNER, SILVIA INÉS; PERRONE, SOFÍA; DEMARCHI, GIANINA; DUDA, GABRIELA; BECU-VILLALOBOS DAMASIA; CRISTINA, CAROLINA

Buenos Aires

Congreso; XIX Congreso de la Sociedad Argentina de Endocrinología y Metabolismo SAEM; 2015

CORTICOTROPINOMAS: UN DESAFÍO DIAGNÓSTICO Y TERAPÉUTICO.AVANCES EN EL ESTUDIO DE LA VÍA DE SEÑALIZACIÓN DE RECEPTORES NOTCHLos corticotropinomas son tumores originados en células de la adenohipófisis productoras de ACTH. Representan del 10% al 20% de los adenomas hipofisarios y exhiben un amplio rango de actividad hormonal y proliferativa. El 80% de los corticotropinomas son microadenomas y se manifiestan por hipersecreción hormonal. Los macroadenomas en cambio, invaden e infiltran las estructuras que rodean la silla turca. Sólo el 2-3% tiene un comportamiento agresivamente invasor.El 3-8% de los adenomas no funcionantes son corticotropinomas silentes que inmunomarcan para ACTH y tienen comportamiento más agresivo. Los Crooke cell adenomas son muy raros. Por la gran diversidad de comportamiento y la dificultad en el manejo y tratamiento, representan un desafío y motivan la búsqueda de marcadores para el diagnóstico y predicción de agresividad.En este sentido estudiamos en nuestra cohorte de corticotropinomas la vía de señalización de los receptores Notch, que participa en el mantenimiento de células madre y en una variedad de procesos celulares como la especificación del destino celular, la diferenciación, la proliferación, la adhesión celular, la migración, la transición epitelio-mesenquimal (EMT) y la apoptosis. La via de Notch ha sido reportada en el desarrollo de diversos tipos de cáncer con un rol promotor o supresor dependiendo del tipo celular y del contexto.La vía Notch comprende 4 receptores de único paso transmembrana (Notch1-4) y 5 ligandos también de membrana (Jagged1,2, y Delta1,3,4). La interacción de los receptores con los ligandos presentes en una célula vecina desencadena una serie de clivajes proteolíticos que producen la liberación del dominio intracelular del receptor y su translocación al núcleo, activando la transcripción de genes blanco como los pertenecientes a las familias Hes y Hey. La sobreexpresión de varios componentes de la vía de Notch ha sido descripta en adenomas de hipófisis no funcionantes y prolactinomas al ser comparados con hipófisis normales. Sin embargo, el rol de la misma en el desarrollo de corticotropinomas no ha sido estudiado.Materiales y MétodosEntre los años 2005 a 2015 fueron intervenidos quirúrgicamente 736 adenomas hipofisarios, 103 resultaron corticotropinomas funcionantes y 29 silentes. En el presente estudio se emplearon 17 de estos corticotropinomas en comparación con otros tipos de adenomas hipofisarios. Durante la cirugía transesfenoidal parte del tejido hipofisario tumoral, excedente a la porción que se envía a anatomía patológica, fue conservado en: a) RNAlater para la extracción de ARN y posterior conversión y medición de ADNc mediante qRT-PCR con primers específicos para cada gen a estudiar o b) en formalina para su estudio por Inmunohistoquímica (IHQ) utilizando 3,3´-diaminobezidina (DAB) y microscopio de campo claro. En paralelo utilizamos la línea celular de corticotropos tumorales murinos AtT20 con el Objetivo de estudiar los niveles y patrón de expresión de los receptores Notch en corticotropinomas y dilucidar su importancia en la tumorogénesis.ResultadosEn las muestras de corticotropinomas detectamos expresión a nivel del ARNm de los receptores Notch1, 2 y 3. El patrón de expresión resultó diferente para cada adenoma, y en particular los niveles de ARNm de Notch3 mostraron valores predominantes en algunos casos.A nivel de la proteína, determinamos la expresión de NOTCH3 por IHQ. De manera interesante, los corticotropinomas mostraron un patrón de tinción característico y los niveles de expresión resultaron variables entre sí dentro del grupo de corticotropinomas estudiado.Al analizar la expresión de los receptores Notch en los corticotropos tumorales murinos AtT20, detectamos que Notch1 y 2 fueron los de mayor expresión mientras que Notch3 y 4 mostraron una expresión reducida.El ligando Jagged1 fue detectado tanto en las muestras de corticotropinomas de pacientes como en la línea AtT20. ConclusionesLos distintos receptores Notch contribuyen de manera diferente en el desarrollo de enfermedades sin embargo no ha sido caracterizado su rol diferencial en el desarrollo de los corticotropinomas. Este trabajo caracteriza la vía de Notch en corticotropinomas en comparación con otros adenomas hipofisarios, y sugiere que la vía de señalización Notch de células madre tendría un rol en la tumorogénesis de estos adenomas. Debido a la complejidad de la vía Notch,la profundización de los estudios de la misma permitirá dilucidar la importancia y el valor predictivo de comportamiento de cada receptor Notch en este tipo de adenomas de hipófisis.