Efecto de IL-1b y TNF-a sobre la producción de óxido nítrico y la multiplicación del T. cruzi en cultivos de cardiocitos de rata

ALBAREDA MC; POSTAN M; SCHAERER B; FICHERA L

Huerta Grande, Córdoba, Argentina

Congreso; VI Congreso Argentino de protozoología y enfermedades parasitarias; 2000

El objetivo de este trabajo es determinar la capacidad de respuesta de células musculares cardíacas infectadas con T.cruzi in vitro, al estímulo con IL-1b y TNF-a. Se infectaron cultivos primarios de cardiocitos obtenidos de ratas Wistar neonatas (5x104 células/pocillo) con el clon de T. cruzi Sylvio-X10/4 (5:1 parásitos:células), a los cuales se los agregó 5, 10 y 15ng de IL-1b ó 25, 50 y 100 ng de TNF-a. Se determinó la presencia de nitritos en el sobrenadante de los cultivos, mediante el método de Griess, y se evaluó por MO el porcentaje de células cardíacas conteniendo amastigotes, a las 72hs post-infección. Los resultados mostraron que el estímulo con IL-1b y TNF-a produjo una acumulación progresiva de NO en los sobrenadantes, tanto en los cultivos infectados como en los controles. El análisis de las curvas dosis-respuesta mostró que el nivel de producción de no estimulado por TNF-a es dosis-dependiente, fenómeno que nos se evidenció con IL-1b. Sin embargo, las concentraciones de nitritos alcanzadas por los cultivos estimulados con IL-1b fueron significativamente mayores que con la estimulación por TNF-a. En los cultivos controles no estimulados (infectados y no infectados), la producción de NO se mantuvo a nivel basal. El análisis de los datos del parasitismo intracelular mostró que el número de células conteniendo nidos de amastigotes en los cultivos tratados con las citoquinas es significativamente menor que en los controles infectados no tratados, correlacionándose inversamente con la producción de NO. El agregado de L-NAME a los cultivos junto con cada citoquina, determinó una inhibición de la producción de NO por los cultivos, neutralizando también el efecto inhibidor de las mismas sobre el crecimiento intracelular del T. cruzi. Estos resultados demuestran la capacidad inhibitoria de las células musculares cardíacas sobre la multiplicación intracelular del T. cruzi, mediada en parte por la producción de NO, cuando son estimuladas por las citoquinas IL-1b y TNF-a