Acción del óxido nítrico (NO) sobre la respuesta inmune celular T específica en ratones crónicamente infectados con Trypanosoma cruzi

NOELIA GROSSO; ALBAREDA M C; ESTEVA MÓNICA; LÓPEZ ALARCÓN MICAELA; LAUCELLA S; FICHERA L

Mar del Plata, Provincia de Buenos Aires

Congreso; IX Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2011

Previamente observamos un aumento en los niveles de NO en pacientes crónicamente infectados con T. cruzi con compromiso cardíaco severo y un efecto inhibitorio del NO sobre la producción de IFN-y específica para T. cruzi (Tc) en las células mononucleares periféricas de estos pacientes (Fichera, 2006 comunicación personal). En este trabajo evaluamos la acción del NO sobre la capacidad citotóxica y secretora de citoquinas específicas para T. cruzi de linfocitos T periféricos y de infiltrados cardíacos en la infección crónica murina. Para ello enfrentamos los esplenocitos y exudados cardíacos de ratones C3H/He crónicamente infectados con el clon Sylvio-X10/4 de T. cruzi, con monocitos autólogos infectados o no, con Tc in vitro, en presencia y ausencia del dador (SNAP) o inhibidor (L-NAME) de NO. La actividad citotóxica se determinó mediante la expresión de CD107a en la población T CD8+ por citometría de flujo, y la capacidad secretora de IFN-γ por ELISA de captura. Los resultados mostraron que la frecuencia de linfocitos T CD8+CD107a+ en ratones infectados es mayor cuando los linfocitos son enfrentados con monocitos autólogos sin infección in vitro, comparado con los niveles de linfocitos T CD8+CD107a+ obtenidos al enfrentar los linfocitos con monocitos autológos infectados con Tc in vitro. La frecuencia de linfocitos con capacidad citotóxica disminuye cuando los linfocitos son enfrentados con monocitos autólogos sin posterior infección in vitro en presencia de SNAP, comparados con el número de linfocitos T CD8+CD107a+ obtenidos en el medio con RPMI (rango de 7 a 60%). Cuando los linfocitos de los mismos ratones son enfrentados con los monocitos infectados con Tc in vitro en presencia de SNAP se observó una menor disminución en los niveles de linfocitos T CD8+CD107a+ (rango de 3 a 27%). Por otro lado observamos que la secreción de IFN-γ secretados tanto por esplenocitos e infiltrados cardíacos enfrentados con monocitos que no recibieron posterior infección in vitro disminuye cuando se agrega SNAP al medio, comparado con los cultivos con medio RPMI. La frecuencia de linfocitos T CD8+CD107a+ aumenta cuando los linfocitos de ratones infectados son enfrentados con monocitos autólogos sin infección in vitro (rango de 35 a 50%) en presencia de L-NAME, siendo menor el aumento cuando se utilizan monocitos autológos infectados con Tc in vitro. Estos resultados preliminares apoyarían la posible acción inhibitoria del NO sobre la capacidad citotóxica y la producción de INF-γ especificas para T. cruzi. Proyecto financiado por ANLIS Malbrán, CONICET, FOCANLIS y PIP.