Ajuste del Medio de selección in vitro para regeneración de Cebolla transgénica

MARINANGELI, PABLO; DELUCHI, BERNARDO; RÍOS, RAÚL; FRANZONE, PASCUAL; CURVETTO, NÉSTOR

Paraná

Congreso; XXVI Congreso Argentino de Horticultura; 2003

aSAHO

Buscamos obtener la concentración mínima efectiva del antibiótico geneticina en los medios de inducción de callos y de regeneración capaz de reducir significativamente la producción de microvástagos desde callos inducidos desde embriones inmaduros (ei) de cebolla Valcatorce INTA para usarlo como medio de selección en transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens.Los ei se cultivaron 120 días en medio de inducción de callos y 30 días en medio de regeneración. Los tratamientos consistieron en: dosis crecientes de geneticina: 5, 10, 20 y 25 mg.L-1, y 300 mg.L-1 de cefotaxima en el medio; y dos controles, uno sin antibióticos y otro con cefotaxima 300 mg.L-1.La cefotaxima no afectó la inducción de callos, c.a. 95%, ni el número de vástagos producido por callo, 5,6; aunque sí disminuyó la proporción de callos que desarrolló vástagos: 73% y 52% para el control sin y con cefotaxima, respectivamente.Más de 10 mg.L-1 de geneticina en el medio inhibió totalmente la inducción de callos. Cinco mg.L-1 produjo un 25% de callos y el 40% de ellos regeneró más de 8 vástagos en promedio; mientras que 10 mg.L-1 de geneticina redujo la formación de callos al 5% y estos fueron no organogénicos. El agregado de más de 10 mg.L-1 de geneticina al medio sería suficiente para seleccionar eventos de transformación portadores del gen de resistencia al antibiótico.