ESTUDIO DE TALASEMIAS: DESDE EL LABORATORIO DE RUTINA A LA IDENTIFICACION MOLECULAR

HERNANDEZ M, BRAGOS I, ZANELLA L, ZABALIA P, FERNANDEZ V, POMBO P, IOMMI P, TORREGUITART F, GARBIERO S, DOS SANTOS S, CAVANNE V, ALZUETA A, OJEDA M, PRATTI A, VOSS M AGRIELLO E.

Mar del Plata

Congreso; XXI Congreso de la Sociedad Argentina de Hematología (SAH); 2013

Sociedad Argentina de Hematología

Introducción: las Talasemias son un grupo heterogéneo de trastornos hereditarios de carácter autosómico recesivo que afectan la producción de Hemoglobina normal con expresión clínica variable. Actualmente es posible identificar la mutación genética causante. Objetivo: Analizar la secuencia de los estudios realizados para llegar a la identificación molecular de estos síndromes. Materiales y método: Se estudiaron 54 pacientes. A todos ellos se les realizaron 1) estudios hematimétricos de rutina: morfología por microscopia óptica y recuentos automatizados, 2) patrón de hie- rro 3) electroforesis capilar de hemoglobina (EHb) (Minicap, Sebia), y 4) estudios moleculares empleando la técnica de ARMS-PCR (Amplification Refractory Mu- tation System); secuenciación directa del gen de beta globina (Método de Sanger) y Gap-PCR. Resultados: en todos los pacientes el metabolismo del Fe fue normal. En los pacientes que presentaron rasgos β talasémicos por microscopia, con eri- trocitos x=5,4x1012/L, VCM x=58fl, HbA2>3.5% (x=5,05%), HbF(rango:0-4,8%) se estudiaron mediante PCR-ARMS las mutaciones responsables de beta talasemia encontrándose en heterocigosis: β°39 (n=18), β°I-1 (n=10), β+I-110 (n=11), β+2- 745 (n=2), β+1-6 (n=1); en 2 pacientes se detectó mediante secuenciación directa una mutación en estado heterocigota que correspondió a la deleción de una adenina (A) en el codón 6 del gen β globina. En una paciente asiática con HbA2: 3,2%, HbF: 0,4% y HbE o V: 11,5% fue positivo el estudio molecular para Hb E. En 2 pacien- tes se determinó β talasemia Mayor: beta+1-110 en homocigosis (n=1) (HbF 66%; HbA2 5%) y en el otro paciente: mutación 39 en un cromosoma y en el otro no se pudo detectar la mutación (HbF 80%; HbA2 5%). En aquellos pacientes (n=7) con HbA2 disminuida (x=2,2) y Hb F entre 0-0,5%, eritrocitos x=5,0x1012/L, VCM x=68fl se estudiaron mediante Gap-PCR mutaciones de alfa talasemia, encontrán- dose en heterocigosis: deleción -α3,7 (n=4) y deleción -α20,5 (n=1). Se encontra- ron 2 pacientes con deleción -α3,7 en homocigosis. Conclusión: Se demuestra la importancia de la evaluación de los índices hematimé- tricos, morfología y EHb sensible y especifica a fin de direccionar en forma óptima el estudio molecular.