MUTACIONES EPIGÉNETICAS EN MIELOFIBROSIS PRIMARIA (MFP)

OJEDA, MARA JORGELINA; BRAGOS IRMA MARGARITA; CALVO, KARINA LUCRECIA; MARONI, GEORGINA; CARBONELL MARÍA MAGDALENA; WILLIAMS, GLADIS MARCELA; PRATTI ARIANNA FLAVIA

ROSARIO

Congreso; XXI Congreso XXXIX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2019

SOCIEDAD DE BIOLOGÍA DE ROSARIO

Introducción: Las neoplasias mieloproliferativas crónicas (NPM) BCR-ABL negativas, incluyen Policitemia Vera (PV), Trombocitemia Esencial (TE) y Mielofibrosis Primaria, constituyen un grupo de enfermedades hematológicas malignas que se caracterizan por una producción aumentada de uno o más tipos celulares sanguíneos. A diferencia PV y TE, la MFP se asocia a una sobrevida significativamente acortada, siendo la tasa de evolución leucémica entre 5-20%. Las mutaciones en los genes JAK2, MPL y CALR, presentes en aproximadamente un 86% de los casos de MFP, constituyen mutaciones conductoras ?drivers?, que están directamente relacionadas al fenotipo mieloproliferativo. Sin embargo, estas mutaciones no explican la heterogeneidad total de las NPM BCR-ABL negativas. El desarrollo de técnicas de secuenciación masiva (Next Generation Sequencing, NGS), permitió la identificación de otro grupo de mutaciones, que si bien no son responsables del fenotipo mieloproliferativo, se encuentran involucradas en la progresión de la enfermedad. Ninguna de estas mutaciones se limita a las NMP y son aún más frecuentes en otras neoplasias hematológicas. Este grupo de mutaciones incluyen genes que intervienen en la regulación epigenética y otros relacionados a la maquinaria de splicing del ARN. Las mutaciones somáticas en ASXL1 son las mutaciones más frecuentes en reguladores epigenéticos después de TET2 en NMP, se encuentran principalmente en MFP y se asocian a mal pronóstico. Objetivos: Detectar mutaciones en ASXL1 y determinar su correlación con el estado mutacional de JAK2, CALR y MPL en nuestra población pacientes con MFP. Materiales y Métodos: Se analizaron muestras de ADN genómico de 52 pacientes con MFP, de los cuales 36 fueron JAK2V617F positivos, 8 CALR positivos y 8 triple negativos, es decir, que no presentaron mutaciones en los genes drivers. La metodología escogida para la detección de más del 90% de las mutaciones descriptas en ASXL1 fue la amplificación por PCR de la región del exón 12 que abarca los aminoácidos 577 al 1024, seguida de secuenciación. Para ello se diseñaron 2 PCR, en una de ellas se amplificó un fragmento de 666 pb que abarca los aminoácidos 577 al 794 (donde se encuentran la mayoría de las mutaciones) y en la otra PCR un fragmento de 770pb que comprende del aminoácido 774 al 1024. Resultados: Se encontraron 7 mutaciones distintas en 10 (20 %) pacientes, 7 con mutaciones en JAK2, 2 con mutaciones en CALR y 1 TN. La mutación más frecuente fue una deleción de 23pb encontrada en el 40% de los casos positivos. De las 6 mutaciones restantes se encontró sólo un caso de cada una. Conclusiones: El 20% de los casos presentó al diagnóstico alguna mutación en ASXL1. Dado que estas mutaciones tienen un significado pronóstico adverso, el estudio de las mismas podría ser de utilidad en la práctica clínica para la toma de decisiones terapéuticas.