DETECCIÓN DE LA ONCOPROTEÍNA PML-RAR𝛂𝛂 MEDIANTE INMUNOFLUORESCENCIA (IF) PARA EL DIAGNÓSTICO RÁPIDO DE LEUCEMIA PROMIELOCÍTICA AGUDA (LPA).

MARONI GEORGINA; OJEDA MARA; WILLIAMS MARCELA; MISAÑA MARINA; SCHOEPF MARÍA; RAVIOLA MARIANA; DETARSIO GERMÁN; PRATTI ARIANNA

Rosario

Congreso; XXIII CONGRESO y XLI REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD DE BIOLOGÍA DE ROSARIO; 2021

SOCIEDAD DE BIOLOGÍA DE ROSARIO

Introducción: La LPA es un subtipo de leucemia mieloide aguda (LMA) de evoluciónmuy agresiva que sin embargo, con terapias dirigidas, puede alcanzar la curación. En el98% de los pacientes, los blastos leucémicos expresan la oncoproteína PML-RAR𝛂𝛂. Eloncogén se genera por la translocación de los brazos largos de los cromosomas 15 y 17 [t(15; 17) (q24; q21)] que causa la fusión de los genes RARα (receptor α del ácido retinoico)en el cromosoma 17 y PML (promyelocytic leukaemia) en el cromosoma 15.Clínicamente, la LPA, representa una emergencia hematológica ya que registra altamortalidad temprana debido al riesgo de hemorragia, coagulación intravasculardiseminada o fibrinólisis primaria, si el diagnóstico no se realiza rápidamente. Lospacientes con sospecha de padecer esta entidad hematológica, deben ser tratadosinmediatamente con las terapias adecuadas, por lo que la detección rápida del PMLRAR𝛂𝛂 es de crucial importancia para el diagnóstico y pronóstico de la enfermedad. Losmétodos de detección incluyen: citogenético (CTG) de médula ósea (MO), reacción encadena de la polimerasa (PCR) anidada e IF. El CTG permite detectar la translocación t(15; 17) (q24; q21) y otras anomalías cromosómicas, aunque el tiempo de proceso puedellevar varios días. La PCR anidada permite detectar cualitativamente el transcripto defusión y la isoforma (bcr 1, 2 ó 3), cuya determinación es fundamental para el monitoreode la enfermedad residual mínima (ERM). La IF permite la detección de la proteína enun lapso de 2 a 4 horas. Materiales y métodos: se obtuvieron muestras de MO o sangreperiférica (SP) de 20 pacientes con sospecha morfológica de LPA. Los frotiscorrespondientes se fijaron con metanol y se utilizó un anticuerpo primario monoclonalde ratón (PG-M3) y un anticuerpo secundario (anti-mouse) conjugado a FITC. Lasmuestras procesadas fueron analizadas en el microscopio Zeizz® Axio A.1. En todas lasmuestras se realizó PCR anidada para corroborar los resultados y determinar la isoformadel transcripto. Resultados: 46.7% de los pacientes resultaron positivos con la técnica deIF. Las muestras positivas por IF se correlacionaron con transcriptos de fusión detectablespor PCR anidada. Se obtuvieron 54% de la isoforma bcr 1 y 46% de la isoforma bcr 3.En todos los casos se obtuvo primero el resultado de la IF con respecto a la PCR anidada.Conclusión: la IF es una técnica sencilla, rápida y sensible para la detección de laoncoproteína PML-RAR𝛂𝛂. Si bien no reemplaza la PCR anidada, constituye unaexcelente técnica para el diagnóstico rápido en el contexto de un paciente con sospechamorfológica y clínica de LPA.