Análisis del estado físico del HPV-16 en mujeres con y sin patología cervical.

CAVATORTA, ANA L.; ALVAREZ GÖDEKEN, ANDRÉS; MAMPRÍN D´ANDREA, RUBÉN; CHOUHY, DIEGO; BOTTAI, HEBE; LEIVA, MERCEDES; GIRI ADRIANA A

Buenos Aires

Congreso; X Congreso Argentino de Virología, III Simposio de Virología Clínica y I Simposio de Virología Veterinaria; 2011

Asociación Argentina de Microbiología

La infección con papilomavirus humanos (HPV) oncogénicos es considerada el factor necesario para el desarrollo de cáncer cervical. Los HPV de alto riesgo oncogénico integran su genoma en el genoma celular en un dado momento de la infección. El estado en que se encuentra el ADN viral se denomina Estado Físico y puede tomar tres formas: episomal, integrado o mixto (coexistencia de ADN episomal e integrado). Dadas las implicancias de la integración en la contribución a la carcinogénesis asociada a HPV, la determinación del estado físico viral se propone como una información de utilidad para el pronóstico de progresión a cáncer y su resolución. En nuestro laboratorio hemos desarrollado el E2/E6 PCR-16, ensayo cualitativo basado en la co-amplificación de fragmentos de los genes E2 y E6 de HPV-16, hibridación líquida con sondas específicas para cada gen y revelado colorimétrico. El estado físico viral se determinó a partir del cociente E2/E6 arrojado con esta metodología y rangos establecidos mediante análisis estadístico. El objetivo de este trabajo fue la validación del ensayo E2/E6 PCR-16 con metodología cuantitativa como método de referencia. Con ese propósito, se desarrolló y optimizó un método de PCR en tiempo real basado en la amplificación independiente de los genes E2 y E6. Una vez realizada la validación, se utilizó el ensayo E2/E6 PCR-16 para determinar el estado físico viral en muestras de cepillado cervical provenientes de mujeres con y sin diagnóstico de patología cervical infectadas con HPV-16. Los resultados obtenidos indicaron que el estado físico mixto fue el más frecuente en general (64%) y en cada una de las entidades citológicas analizadas. Sin embargo, en las muestras que resultaron con estado físico episomal la citología mas frecuente fue la negativa (61%). Por otro lado, se observó una leve asociación entre el estado físico y la citología (p= 0,06) y una fuerte asociación entre el estado físico y el servicio hospitalario del cual provenían las pacientes (p= 0,0000). Por último, el valor promedio del cociente E2/E6 fue significativamente mayor en las pacientes sin enfermedad (provenientes del Servicio de Ginecología General) respecto al de las que presentaban diagnóstico de patología cervical (provenientes del Servicio Patología Cervical) (p= 0,0000). En conclusión, el cociente E2/E6 podría ser utilizado para predecir la capacidad o dificultad de una mujer para controlar la infección y por lo tanto pronosticar si la lesión progresará o regresará. En este contexto, el ensayo E2/E6 PCR-16 es una herramienta útil que requiere equipamiento mínimo y adaptable a laboratorios de mediana complejidad y que contribuye a un seguimiento más eficiente de las mujeres infectadas con HPV-16.