Enzimas celulolíticas y xilanolíticas en Thecotheus pelletieri.

PARDO, AG; OBERTELLO M,; FORCHIASSIN, F

San Miguel de Tucumán, Tucumán, Argentina.

Congreso; VIII Congreso Argentino de Micología.; 1998

Asociación Argentina de Micología

Se comparó la capacidad productora de celulasas y xilanasas (endoglucanasa, b-glucanasa, endoxilanasa, b-xilosidasa) de distintas cepas pertenecientes a Thecotheus pelletieri, en medio de cultivo líquido, utilizando celulosa microcristalina y xilano como inductores de los dos sistemas enzimáticos. Las cepas ensayadas fueron las siguientes: BAFC 2062, 2063, 2073, 2077, 2081, 2088, 2089, 2090. Todas las cepas utilizadas fueron capaces de crecer y producir los sistemas celulolítico y xilanolítico en cultivo, siendo la cepa BAFC 2077 la que presentó mayor capacidad productora de celulasas y xilanasas en las condiciones ensayadas. Posteriormente, se variaron distintas condiciones de cultivo a fin de optimizar la producción enzimática de esta cepa, así como determinar el efecto distintos factores que influyen sobre la misma. Condiciones de cultivo en agitación orbital favorecieron la producción enzimático y el crecimiento fúngico (proteínas de micelio). Por otro parte, la asparagina en una concentración equivalente de 0.75 g N/L resultó ser la mejor fuente nitrogenada de las ensayadas. La cepa BAFC 2077 de T. pelletieri no fue capaz de crecer con amonio como fuente de nitrógeno. Sobre la base de estudios de cinética de absorción de amonio y nitrato, a partir del medio de cultivo, se puede decir que esto se debería a deficiencias en la síntesis de transportadores de amonio. Se determinó la influencia de distintos surfactantes sobre la producción enzimática (Tween 80, Tween 20, Triton X-100). El Tween 80 no tuvo efecto alguno sobre el crecimiento y producción enzimática, mientras que el Tween 20 y el Triton X-100 fueron completamente inhibitorios. Por medio de estudios de variación de las concentraciones relativas de celulosa y xilano en el medio de cultivo se pudo determinar que tanto celulosa como xilano inducen (algún producto soluble de su hidrólisis) la síntesis tanto de celulasas como de xilanasas, siendo los substratos específicos correspondientes los mejores inductores en cada caso. Se demostró el carácter inducible de los sistemas celulolítico y xilanolítico mediante experimentos de inhibición de la síntesis proteica utilizando cicloheximida (100 mg/mL) o bromuro de etidio (100 mg/mL). Además se comprobó que la glucosa y la xilosa reprimen la síntesis de celulasas y xilanasas en T. pelletieri.