Caractérisation d'un gène de métallothionéine exprimé dans les nodules fixateurs d'azote de Casuarina glauca.

OBERTELLO M,; LAPLAZE, L; AUGUY, F; BOGUSZ, D; FRANCHE, C

Clermont-Ferrand, Francia

Jornada; 8 Journées Biologie Moléculaire des Ligneux.; 2004

Las plantas de la familia Casuarinaceae son plantas actinorrícicas que poseen la propiedad de vivir en simbiosis con un actinomicete fijador de nitrógeno llamado Frankia. La fijación del nitrógeno atmosférico se efectúa en un órgano especializado, el nódulo actinorrícico. La simbiosis Frankia-planta actinorrícica se distingue de la simbiosis Rhizobium-leguminosas por características específicas que hacen de ella un modelo de estudio único (Wall, 2000). En este trabajo se estudió la función de cgMT1, una metaloproteína aislada de nódulos de Casuarina glauca. Se estudió la secuencia promotora de dicho gen utilizando plantas transgénicas de Casuarinaceae, y por otro lado se estudió la función simbiótica y no simbiótica del gen utilizando plantas transformadas con el gen en forma antisentido o sobreexpresandolo. Los resultados obtenidos en plantas transgénicas de Casuarina mostraron que el promotor PcgMT1 confiere expresión del gen reportero GUS en las raíces y en las células fijadoras de nitrógeno de los nódulos. Se observó también que esta especificidad de expresión esta conservada en Arabidopsis. Los resultados obtenidos muestran que el promotor PcgMT1 se induce por el estrés oxidativo, paraquat y cortes), levemente por estrés salino, y aparentemente no presenta respuesta a los metales. A fin de conocer la función del gen cgMT1 durante la nodulación, se transformaron plantas de C. glauca con construcciones antisentido y de sobreexpresión de este gen. Fue imposible obtener callos transformados cuando se uso la construcción antisentido 35S-AScgMT1. Este resultado sugiere que la metalotioneína tendría una función indispensable en la fisiología de los arboles actinorrícicos. El análisis de plantas transformadas con las construcciones de sobreexpresión del gen está en curso.