Caracterización de una nueva Baeyer-Villiger monooxigenasa de origen bacteriano

DANIELA V. RIAL; ROMINA D. CECCOLI; DARÍO A. BIANCHI,

Montevideo

Simposio; II Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones (SiLaBB II) VII Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2016

Facultad de Química, Universidad de la República

Las Baeyer-Villiger monooxigenasas (BVMOs) tipo I son flavoenzimas dependientes de FAD que utilizan NADPH para catalizar la inserción de un átomo de oxígeno próximo a un grupo carbonilo del sustrato, a partir de oxígeno molecular. Estas enzimas son de gran interés tanto en el ámbito académico como el industrial ya que mediante la biooxidación de cetonas permiten obtener ésteres o lactonas de forma selectiva, eficiente y ambientalmente amigable. Estos productos poseen mucho valor como intermediarios para la síntesis de compuestos con actividad biológica, productos naturales y análogos [1-4].El objetivo de nuestro trabajo es identificar y caracterizar nuevas BVMOs que puedan ser utilizadas como biocatalizadores para aplicaciones en síntesis química. Nuestro grupo ha identificado por homología de secuencias seis posibles genes candidatos en el genoma de la bacteria Bradyrhizobium japonicum, y hemos avanzado en el estudio de algunas de estas posibles BVMOs. En este trabajo presentaremos el clonado de un gen de B. japonicum que hemos denominado bj05. El mismo fue expresado en forma recombinante en células de Escherichia coli BL21(DE3) y, mediante electroforesis en condiciones desnaturalizantes, hemos detectado la presencia de una proteína soluble del tamaño esperado. Además, hemos evaluado su perfil de aceptación de sustratos mediante ensayos de biotransformación en células enteras. Este nuevo biocatalizador del tipo BVMO fue capaz de oxidar varias cetonas entre ellas algunas cetonas alifáticas lineales, fenilacetona y (±)-cis-biciclo[3.2.0]hept-2-en-6-ona.Este trabajo fue financiado por CONICET, ANPCyT y UNR. Los autores son miembros de la Carrera del Investigador Científico y Tecnológico de CONICET, Argentina.