Alfa-hemolisina de Escherichia coli forma poros proteo-lipídicos en membranas

V. HERLAX; L. BAKAS

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

SAIC, SAI, SAFE, SAB, SAN y SAF

   Alpha-hemolysina es una toxina proteíca (107 KDa) secretada por Escherichia coli que actua a nivel de la  membrana plasmática de células eucarióticas . Para todas las composiciones estudiadas el agregado de concentraciones nanomolares resulta en un incremento en la conductancia de la bicapa y una disminución de la estabilidad de la membrana.El incremento de la conductancia fue dependiente del potencial, siendo el incremento en la conductancia mas rápido cuando se aplicaron potenciales positivos el lado cis. Los registros mostraron fluctuaciones de corta duración las cuales no son típicas de los canales proteicos. Los histogramas de conductancia mostraron una dependencia con la composición, con una amplia distribución en el caso de DOPE, y mas estrechos para DOPC y DOPC/LPS con máximos a 0.34, 0.40 y 0.22 nS respectivamente. La desestabilización de la bicapa fue cuantificada a partir de medidas de la vida media de la membrana en función del voltaje aplicado. HlyA disminuye la vida media en 3 ordenes de magnitud en función del voltaje. La presencia de lípidos no lamelares con curvatura positiva como lisofosfatidilcolina (LPC) reduce significativamente la desestabilización de la membrana inducida por HlyA. Estos resultados están de acuerdo con los resultados obtenidos por ensayos de pérdida de marcadores fluorescentes encapsulados en liposomas. Paralelamente, medidas de la capacitancia específica están de acuerdo con un incremento en el espesor de la bicapa. De acuerdo con la teoría de formación de poros lipídicos HlyA produce una disminución en la tensión lineal del poro. Este es un parámetro clave en la formación de poros lipídicos, ya que da una medida de la energía requerida para formar los bordes del poro. Nosotros sugerimos que esta toxina actúa promoviendo la formación de poros formados por complejos supramoleculares lípido-proteína. Nosotros sugerimos que esta toxina actúa promoviendo la formación de poros formados por complejos supramoleculares lípido-proteína. Nosotros sugerimos que esta toxina actúa promoviendo la formación de poros formados por complejos supramoleculares lípido-proteína. Nosotros sugerimos que esta toxina actúa promoviendo la formación de poros formados por complejos supramoleculares lípido-proteína.