EFECTOS BIOLÓGICOS DE HERBICIDAS SINTÉTICOS SOBRE CÉLULAS EUCARIOTA MAMÍFERAS

PACCHIARONI A, SIMONELLA L, ICELY PA, SOTOMAYOR CE Y VE SOSA.

MAR DEL PLATA ARGENTINA

Simposio; 4. XVI Simposio Nacional Química Orgánica (SAIQO); 2007

) Sociedad Argentina de Investigación Química Orgánica

En una de nuestras líneas de investigación orientada a la síntesis[1] total de bisabolenos bioactivos, se obtuvo una serie de intermediarios con distintas características estructurales (1-5). R             H          CH3                  4                                                            5               1            2                                                3 Debido a que los herbicidas pueden actuar como agentes contaminantes y  tomar contacto con diferentes organismos, en el presente trabajo se evaluó  la actividad biológica de los compuestos  1 y 2 sobre células eucariotas de mamíferos.  Para ello se emplearon  cultivos celulares de macrófagos murinos de la línea RAW 256 (2 x 105 células por well), los que fueron  expuestos a los compuestos en estudio durante diferentes  períodos de contacto  (1 y 24hs)  y  un variado rango de concentraciones (10, 5, 1 y 0,5 µg/ml). De acuerdo a la metodología  empleada el sobrenadante de cultivo y la monocapa de células, fueron utilizadas para ensayos de toxicidad y viabilidad celular y estudios citomorfológicos. La toxicidad celular fue evaluada por la liberación de la enzima citosólica Lactato dehidrogenasa (LDH) al medio de cultivo. Para determinar la viabilidad celular se empleó la técnica de  reducción del MTT (Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol), basada  en la funcionalidad de la enzima mitocondrial succinato-dehidrogenasa la cual reduce el MTT(amarillo) a formazán (azul), donde la cantidad de células vivas es proporcional a la cantidad de formazán producido; los resultados fueron expresados como  % de muerte celular. Los estudios citomorfológicos fueron efectuados mediante coloraciones y microscopía de contraste de fase.  Se pudo observar  que a períodos de incubación prolongados (24hs) y a dosis de 0,5 y 1 µg para ambos compuestos, no se observaron efectos tóxicos. Interesantemente los compuestos 1 y 2 ejercieron un marcado efecto tóxico sobre la población celular, observándose un mayor grado de daño a las dosis de 10 y 5 µg (p vs basal<0,05). Estos resultados evidenciaron una estrecha correlación con el % de muerte celular determinado  al cabo de 24hs de cultivo, observándose una mortalidad cercana al 60% para las dosis mayores ensayadas. La observación microscópica corroboró el daño celular detectado. Estas evidencias indican que los compuestos ensayados en forma dosis y tiempo dependientes fueron capaces de injuriar células mamíferas eucariotas. [1] Tiels, L. F., Eicher, Th. 1988. Reactions and Syntheses in the Organic Chemistry Laboratory