Anfotericina B y Fluconazol modulan la activación de la vía de la arginasa en la línea celular de monocitos humanos (U937) expuestos a Candida albicans

ICELY, PAULA A; RENNA, MARÍA S.; SOTOMAYOR, CLAUDIA E

POSADAS

Congreso; 18. XII Congreso Argentino de Micologia,; 2011

ASOCIACION ARGENTINA MICOLOGIA

Los fagocitos, incluyendo los monocitos/macrófagos, juegan un rol importante en los mecanismos de defensa contra la infección por C.albicans En células de mamíferos, L-arginina es usada como sustrato por la Oxido Nítrico Sintetasa (NOS), arginasa, arginina-glicina transaminasa, y otras enzimas. En el metabolismo de la L-arginina el balance entre la activación de la vía de la Oxido Nítrico Sintetasa inducible (iNOS) (clásica) vs la arginasa (alterna), promueve en estas células dos estados alternativos que han sido asociados a diferentes respuestas inmunes del huésped. Mientras que la vía clásica favorece la respuesta protectora del huésped, la alterna favorecería al patógeno facilitando la infección. En el presente trabajo se evaluó la activación de esta vía metabólica en la línea celular de monocitos humanos (U937) desafiados con C. albicans (HNC-387) y expuestos a dos antifúngicos frecuentemente utilizados en el tratamiento de esta micosis Fluconazol (Fluco) y Anfotericina B (Anfo B). La línea celular U937 fue cultivada a una concentración de 3x105 células/mL e incubada con C.albicans, en presencia o ausencia de los diferentes estímulos (LPS y PMA) o diferentes agentes antifúngicos solos o en combinación con C.albicans. Los sobrenadantes fueron separados y usados para la determinación de óxido nitríco (NO) y la monocapa celular fue utilizada para la determinación de la actividad de arginasa. La incubación del patógeno con la línea celular en estudio indujo la activación de la vía de la L-arginina de manera dosis dependiente(p<0,05) alcanzando  niveles comparables con la de un activador clásico (PMA), mientras que la producción de NO estuvo ausente. En este sistema, el balance entre ambas vías metabólicas favorece la producción de arginasa. Una disminución de la activación de la vía se observó luego de la utilización del inhibidor específico norNOHA. El agregado al cultivo de Anfo B (2.5mg/ml) y Fluco (4mg/ml) produjo una disminución del 80% en la actividadtotal de arginasa (p<0,05). Interesantemente C.albicans exhibió actividad endógena de arginasa la que pudo ser parcialmente inhibida por norNOHA y Anfo B (p<0,05). El presente trabajo demuestra la capacidad del hongo de promover la vía alterna en los monocitos U937 y la abilidad de los antifúngicos de interferir en esta vía, aportando un mecanismo adicional de acción de estos fármacos sobre las células inmunes y el hongo